بهینه سازی بیان، استخراج و تخلیص ناحیه n- ترمینال ژن ipad شیگلا دیسانتری با استفاده از آنالیز پروتئومیکسی
مهدی حصارکی، mahdi hesaraki 1biological sciences research center, imam hossein university, tehran, i.r. iran;1مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشگاه جامع امام حسین (ع) تهران، ایران مجتبی سعادتی، mogtaba saadati 1biological sciences research center, imam hossein university, tehran, i.r. iran;تهران-دانشگاه جامع امام حسین (ع)، دانشکده علوم پایه- مرکز تحقیقات زیست شناسی حسین هنری، hosseyin honari 1biological sciences research center, imam hossein university, tehran, i.r. iran;1مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشگاه جامع امام حسین (ع) تهران، ایران غلامرضا اولاد، gholamreza olad 1biological sciences research center, imam hossein university, tehran, i.r. iran;1مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشگاه جامع امام حسین (ع) تهران، ایران محمد هیئت، mohamad heiat 2biotechnology research center, baqiyatallah university, tehran, i.r. iranمرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، دانشگاه علوم پزشکی مختار زارع، mokhtar zare 1biological sciences research center, imam hossein university, tehran, i.r. iran;1مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشگاه جامع امام حسین (ع) تهران، ایران
چکیده
زمینه و هدف: باکتری شیگلا دیسانتری یکی از عوامل پاتوژن مهم است که علی رغم تلاش های چندین ساله برای تهیه واکسن علیه آن هنوز مطالعات گسترده پیرامون آن ادامه دارد. محصولات پلاسمید تهاجمی شیگلا (ipa) نقش مهمی در تهاجم باکتری ایفا می کنند. پروتئین ipad یکی از اعضای این خانواده است که به عنوان کاندید واکسن شیگلا مطرح می باشد. مطالعات متعدد بر روی این پروتئین نشان داده که ناحیه n- ترمینال آن نقش مهمی در فرآیند تهاجمی باکتری دارد. این مطالعه با هدف بهینه سازی بیان n- ترمینال ژن ipad به منظور افزایش تولید پروتئین نو ترکیب انجام شد. روش بررسی: در این مطالعه تجربی-آزمایشگاهی باکتری e. coli bl21(de3) حامل پلاسمید pet-28a که ژن ناحیه n- ترمینال ipad در آن همسانه سازی شده بود جهت مطالعات مورد استفاده قرار گرفت. پس از کشت باکتری، تاثیر سه فاکتور زمان القا، دما و غلظت ماده القا کننده ایزو-پروپیل-تایوبتا دی گالاکتوپیرانوزید (iptg) بر میزان بیان، با استفاده از ژل سدیم دو دسیل سولفات-پلی آکریل آمید (sds-page) به صورت کیفی بررسی گردید. با استفاده از تصاویر دو بعدی تهیه شده از ژل ها با کمک نرم افزار آنالیز ژل های دو بعدی بررسی کمی بیان پروتئین صورت پذیرفت. مراحل استخراج و تخلیص پروتئین نوترکیب با کمک روش شیب اوره آغاز و با عبور نمونه ها از ستون کروماتوگرافی پایان یافت. یافته ها: نتایج بر روی ژل های sds-page نشان داد که میزان تقریبا مشابهی از تولید پروتئین نوترکیب در زمان القا، دما و غلظت های مختلف iptg بیان وجود دارد، اما یافته های نرم افزاری نشان داد بهترین شرایط بیان ناحیه n- ترمینال پروتئین ipad در وکتور pet-28a دمای 37 درجه سانتی گراد، غلظت 7/0 میلی مولار iptg و زمان 3 ساعت بعد از القا می باشد. نتیجه گیری: بر اساس نتایج این مطالعـــه هر پروتئین بعد از فرآیند همسانه سازی شرایط بیان مخصوص به خود را دارا می باشد که شرایط دمایی و طول زمان القا سلول ها در مقدار تولید پروتئین موثرتر می باشند.
زمینه و هدف: باکتری شیگلا دیسانتری یکی از عوامل پاتوژن مهم است که علیرغم تلاش‌های چندین ساله برای تهیه واکسن علیه آن هنوز مطالعات گسترده پیرامون آن ادامه دارد. محصولات پلاسمید تهاجمی شیگلا (Ipa) نقش مهمی در تهاجم باکتری ایفا می‌کنند. پروتئین IpaD یکی از اعضای این خانواده است که
مقالهمجله دانشگاه علوم پزشکی شهرکردغلامرضا اولاد، gholamreza olad تهران- دانشگاه امام حسین (ع)- مرکز تحقیقات زیست شناسی محمود تولایی، mahmod tavalaee applied biotechnological research center, baghiyatallah university of medical sciences, tehran, iran, زهیر محمد حسن، zahir mohamad hasan 3medical sciences faculty, tarbiat modaress university, tehran, iran فیروز ابراهیمی
زمینه و هدف: شیگلا دیسانتری یکی از مهمترین باکتری های بیماریزا ی روده ای انسان است. شیگاتوکسین (سم این باکتری) با ورود به سلول های اپیتلیال باعث مهار سنتز پروتئین و مرگ سلولی می شود. علیرغم مطالعات فراوان جهت تولید واکسن علیه آن، هنوز ضرورت تداوم مطالعه در حصول به پروتئین نوترکیب
زمینه و هدف: شیگلا دیسانتری یکی از مهمترین باکتری های بیماریزا‌ی روده‌ای انسان است. شیگاتوکسین (سم این باکتری) با ورود به سلول های اپیتلیال باعث مهار سنتز پروتئین و مرگ سلولی می شود. علیرغم مطالعات فراوان جهت تولید واکسن علیه آن، هنوز ضرورت تداوم مطالعه در حصول به پروتئین نوترکیب
مقالهمجله دانشگاه علوم پزشکی قمامیرحسین احمدی، amir hossein ahmadi imam hossein comprehensive universityدانشگاه جامع امام حسین(ع) حسین هنری، hossein honari imam hossein comprehensive universityدانشگاه جامع امام حسین(ع) محمد ابراهیم مینایی، mohammad ebrahim minaei imam hossein comprehensive universityدانشگاه جامع امام حسین(ع)
زمینه و هدف: جنس شیگلا یکی از عوامل اصلی بیماری اسهال در انسان و باسیلوس آنتراسیس عامل سیاه زخم (یک بیماری مشترک بین انسان و دام) می باشد. یکی از مهم ترین فاکتورهای بیماریزایی شیگلا، پروتئین ipad است. همسانه سازی n ترمینال ژن ipad به همراه ژن pa20 که دارای نقش ایمنی زایی است، به
مقالهعلوم و فناوری های پدافند نوینغلامرضا اولاد، gholamreza oulad applied biotechnology research centerتهرانپارس حکیمیه کوی دانشگاه امام حسین ع فاز2 خیابان نشاط بلوک 59 واحد 12 محمود تولایی، mahmood tavallai baqiyatallah university of medical sciencesدانشگاه بقیه الل عج فیروز ابراهیمی، firooz ebrahimi imam hossein universityدانشگاه امام حسین(ع) جعفر امانی
چکیده: هدف: شیگلا دیسانتری با تولید سم stx (با دو زیر واحد aوb) یکی از مهمترین باکتریهای بیماریزا ی روده ای برای انسان است. این سم با ورود به سلول های اپیتلیال باعث مهار سنتز پروتئین و مرگ سلولی خواهد شد. علیرغم مطالعات فراوان جهت تولید واکسن ، هنوز ضرورت تداوم مطالعه در دستیابی
چکیده: هدف: شیگلا دیسانتری با تولید سم stx (با دو زیر واحد AوB) یکی از مهمترین باکتریهای بیماریزا‌ی روده ای برای انسان است. این سم با ورود به سلول های اپیتلیال باعث مهار سنتز پروتئین و مرگ سلولی خواهد شد. علیرغم مطالعات فراوان جهت تولید واکسن ، هنوز ضرورت تداوم مطالعه در دستیابی