طراحی ژن stxa موتانت (g۲۳۴e- r۱۷۰l -a۲۳۱d) شیگلا دیسانتری و بهینه سازی بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب آن
غلامرضا اولاد، gholamreza olad تهران- دانشگاه امام حسین (ع)- مرکز تحقیقات زیست شناسی محمود تولایی، mahmod tavalaee applied biotechnological research center, baghiyatallah university of medical sciences, tehran, iran, زهیر محمد حسن، zahir mohamad hasan 3medical sciences faculty, tarbiat modaress university, tehran, iran فیروز ابراهیمی، firoz ebrahimi 1biological research center, imam hosain university, tehran, iran جعفر سلیمیان، jafar salimian biological research center, imam hosain university, tehran, iran شهرام نظریان، shahram nazarean biological research center, imam hosain university, tehran, iran علی اصغر رحیمی
چکیده
زمینه و هدف: شیگلا دیسانتری یکی از مهمترین باکتری های بیماریزا ی روده ای انسان است. شیگاتوکسین (سم این باکتری) با ورود به سلول های اپیتلیال باعث مهار سنتز پروتئین و مرگ سلولی می شود. علیرغم مطالعات فراوان جهت تولید واکسن علیه آن، هنوز ضرورت تداوم مطالعه در حصول به پروتئین نوترکیب شیگاتوکسین نوع a (stxa) وجود دارد. این مطالعه با هدف بررسی و تعیین جایگاه های مناسب جهش و طراحی ژن سینتتیک زیر واحد stxa و سپس بیان و بهینه سازی آن و در نهایت بررسی روش تخلیص آن جهت مطالعات بعدی ایمنی زایی انجام شد. روش بررسی: در این مطالعه توصیفی-آزمایشگاهی پس از طراحی و تهیه ژن صناعی pet28a/stxa موتانت (g234e– r170l -a231d)، واکنش pcr جهت کنترل صحت حضور این ژن انجام گردید. پس از انتقال این وکتور به سلول میزبان bl21 de3، بیان، بهینه سازی و نهایتاً تخلیص پروتئین حاصل بررسی گردید. یافته ها: نتیجه مطالعات اولیه منجر به طراحی ژن stxa موتانت گردید. نتایج واکنش pcr با استفاده از پلاسمید سنتتیک نشان از صحت ژن مورد مطالعه داشت. پس از بیان این ژن در سلول میزبان bl21 de3، بهینه سازی آن نیز بررسی گردید. در نتیجه تولید مقادیر زیادی از این پروتئین به شکل اجسام توده ای نشان داده شد. تخلیص انکلوژن بادی و سپس محلول سازی پروتئین های مربوطه با استفاده از روش های تلفیقی صورت گرفت. نتیجه گیری: با توجه به مکانیسم اثر شیگاتوکسین و طراحی جهش های انتخابی با آرایش جدید در این ژن، پیش بینی می شود که این پروتئین بیانی، دارای اثر سمیت کمتری نسبت به سایر موتانت های قبلی داشته باشد، در نتیجه می تواند به عنوان کاندید واکسن برتر مطرح گردد.
زمینه و هدف: شیگلا دیسانتری یکی از مهمترین باکتری های بیماریزا‌ی روده‌ای انسان است. شیگاتوکسین (سم این باکتری) با ورود به سلول های اپیتلیال باعث مهار سنتز پروتئین و مرگ سلولی می شود. علیرغم مطالعات فراوان جهت تولید واکسن علیه آن، هنوز ضرورت تداوم مطالعه در حصول به پروتئین نوترکیب
مقالهمجله دانشگاه علوم پزشکی شهرکردمهدی حصارکی، mahdi hesaraki 1biological sciences research center, imam hossein university, tehran, i.r. iran;1مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشگاه جامع امام حسین (ع) تهران، ایران مجتبی سعادتی، mogtaba saadati 1biological sciences research center, imam hossein university, tehran, i.r. iran;تهران-دانشگاه جامع امام حسین (ع)، دانشکده علوم پایه- مرکز تحقیقات زیست شناسی حسین هنری، hosseyin honari 1biological sciences research center, imam hossein university, tehran, i.r. iran;1مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشگاه جامع امام حسین (ع) تهران، ایران غلامرضا اولاد
زمینه و هدف: باکتری شیگلا دیسانتری یکی از عوامل پاتوژن مهم است که علی رغم تلاش های چندین ساله برای تهیه واکسن علیه آن هنوز مطالعات گسترده پیرامون آن ادامه دارد. محصولات پلاسمید تهاجمی شیگلا (ipa) نقش مهمی در تهاجم باکتری ایفا می کنند. پروتئین ipad یکی از اعضای این خانواده است که
زمینه و هدف: باکتری شیگلا دیسانتری یکی از عوامل پاتوژن مهم است که علیرغم تلاش‌های چندین ساله برای تهیه واکسن علیه آن هنوز مطالعات گسترده پیرامون آن ادامه دارد. محصولات پلاسمید تهاجمی شیگلا (Ipa) نقش مهمی در تهاجم باکتری ایفا می‌کنند. پروتئین IpaD یکی از اعضای این خانواده است که
مقالهعلوم و فناوری های پدافند نوینغلامرضا اولاد، gholamreza oulad applied biotechnology research centerتهرانپارس حکیمیه کوی دانشگاه امام حسین ع فاز2 خیابان نشاط بلوک 59 واحد 12 محمود تولایی، mahmood tavallai baqiyatallah university of medical sciencesدانشگاه بقیه الل عج فیروز ابراهیمی، firooz ebrahimi imam hossein universityدانشگاه امام حسین(ع) جعفر امانی
چکیده: هدف: شیگلا دیسانتری با تولید سم stx (با دو زیر واحد aوb) یکی از مهمترین باکتریهای بیماریزا ی روده ای برای انسان است. این سم با ورود به سلول های اپیتلیال باعث مهار سنتز پروتئین و مرگ سلولی خواهد شد. علیرغم مطالعات فراوان جهت تولید واکسن ، هنوز ضرورت تداوم مطالعه در دستیابی
چکیده: هدف: شیگلا دیسانتری با تولید سم stx (با دو زیر واحد AوB) یکی از مهمترین باکتریهای بیماریزا‌ی روده ای برای انسان است. این سم با ورود به سلول های اپیتلیال باعث مهار سنتز پروتئین و مرگ سلولی خواهد شد. علیرغم مطالعات فراوان جهت تولید واکسن ، هنوز ضرورت تداوم مطالعه در دستیابی