تولید لنتیویروسهای نوترکیب بیان کننده mir-۱۶ توسط ترانسفکشن موقت سلولهای ۲۹۳t
sadegh babashah، department of genetics, faculty of biological sciences, tarbiat modares university, tehran, iran majid sadeghizadeh، department of genetics, faculty of biological sciences, tarbiat modares university, tehran, iran masoud soleimani، department of hematology, faculty of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran abbas hajifathali، taleghani hospital, shahid beheshti university of medical sciences, tehran, iran mostafa rezaei tavirani، proteomics research center, faculty of paramedical sciences, shahid beheshti university of medical sciences, tehran, iran
چکیده
هدف از این مطالعه تولید لنتیویروسهای بیان کننده mir-16 است. پس از ترانسداکشن، تغییرات ایجاد شده در سطوح بیانی این mirna و پروتئین هدف آن ارزیابی خواهد شد. مواد و روشها: قطعه ژنی حاوی توالی پیشساز mir-16 در پلاسمید لنتی ویروسی کلون شد. سازه نوترکیب همراه با پلاسمیدهای کد کننده پروتئینهای ساختاری و پوششی ویروس توسط کلسیم-فسفات به رده سلولی 293t ترانسفکت شد. سوپ سلولی جمعآوری و ذرات ویروسی توسط اولتراسانترفیوژ رسوب داده شد و تعیین تیتر ویروس توسط میکروسکوپ فلورسانت و روش فلوسایتومتری انجام یافت. تغییرات در سطوح بیانی mir-16 و پروتئین هدف آن بهترتیب توسط روشهای real-time pcr و لکهگذاری وسترن ارزیابی شد. نتایج: تأیید حضور ژن در پلاسمید و درستی توالی آن توسط کلونی-pcr، هضم آنزیمی کلونهای مثبت و توالییابی انجام شد. پس از ترانسفکشن همزمان سلولهای 293t با پلاسمید لنتی-mir و پلاسمیدهای ساختاری و پوششی ویروس و تعیین تیتر ذرات ویروسی تغلیظ شده، سلولهای مورد نظر با لنتیویروس نوترکیب آلوده شدند. بیشینه بیان gfp در بیش از 80 درصد سلولهای آلوده شده با لنتیویروس در moi=1 حاصل شد. بررسی سطوح بیانی mir-16 توسط real-time pcr نشان داد که بیان این میکرو rna در سلولهای آلوده شده با لنتیویروس واجد mir-16 در مقایسه با گروه کنترل افزایش محسوسی دارد. تجزیه و تحلیل لکهگذاری وسترن نیز نشان داد بیش بیان mir-16 سبب کاهش بیان پروتئین bcl-2 میشود. نتیجهگیری: سیستم بیانی لنتیویروسی ارایه شده میتواند بهعنوان ابزاری در راستای تحویلرسانی مؤثر مقلدهای میکرو rna به سلول پیشنهاد شود
مقالهسلول و بافتموسی گردانه، دانشگاه آزاد اسلامی، آمل، واحد آیت اله آملی، گروه زیست شناسی، آمل، ایران عباس رحیمی شم آبادی، دانشجوی کارشناسی ارشد زیست شناسی سلولی- مولکولی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری عمران اسماعیل زاده، کارشناس ارشد ژنتیک، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
هدف: هدف این تحقیق تولید لنتی ویروسهای حامل ژن nurr1 و بیان در سلولهای انسانی میباشد. مواد و روشها: قطعه ژنی ires-egfp با آنزیمهای bgl ll/not1 از ناقل pires2-egfp جدا و با klenow کور (blunt) گردید. ناقل لنتی ویروسی pnl-egfp/cmv/wpredu3 با آنزیمهای nhe1/ xho1 برش و دو سر آن
مقالهمجله دانشگاه علوم پزشکی اراکفریدا بهزادیان، farida behzadian research senter for sciences and biotechnology,tehran, iran, p.o.box 15875-1774پژوهشکده علوم و فن آوری زیستی ، گروه مهندسی ژنتیک ، لویزان، صندوق پستی 1774- زهرا گودرزی، zahra goodarzi applied virology research center, baqyatallah univesity of medical sciences , tehran, iranمرکز تحقیقات کاربردی ویروس شناسی ، دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا... ، تهران، ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه صنعتی مالک اشتر (malek ashtar university of technology) اسماعیل صابرفر، esmaiel saberfar applied virology research center, baqyatallah univesity of medical sciences , tehran, iranمرکز تحقیقات کاربردی ویروس شناسی ، دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا... ، تهران، ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (baqiyatallah university of medical sciences)
زمینه و هدف:تغییرات ژنتیکی ویروس آنفلونزا، هر ساله باعث ایجاد اپیدمی های جدید در سراسر دنیا می شود. ساخت یک واکسن جدید به منظور پیش گیری از ویروس آنفلونزا در چند سال اخیر هدف اصلی پژوهشگران بوده است. هدف ما از این پژوهش،ساختن باکیلوویروس نوترکیبی است که بتواند دو گلیکوپروتئین سطح
پایان‌نامه۲۰۱۳وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه گیلان - دانشکده علوم پایهمعصومه کامرانی نیارق
دیابت نوع 1 یک بیماری خودایمنی است که میلیونها نفر از مردم دنیا به آن مبتلا هستند، دلیل اصلی این بیماری تخریب خودایمن سلول های مولد انسولین در پانکراس است.pdx–1به عنوان یک فاکتور رونویسی هومئودمین، مهمترین فاکتور ژنتیکی در تکوین پانکراس و رونویسی ژن انسولین است. یکی از روش های در
مقالهپژوهش های آسیب شناسی زیستیhessam mirshahabi، department of virology, faculty of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran mohsen karimi، biotechnology research center, pasture institute of iran, tehran, iran farida behzadian، department of molecular genetics, research center for science and biotechnology, malek ashtar university, tehran, iran farzaneh sabahi
هدف: با توجه به اینکه واکسن موثری علیه ویروس هپاتیت b(hbv) وجود دارد، شیوع جهانی عفونت با این ویروس کاهش چشمگیری پیدا نکرده است.hbv برخلاف بسیاری از ویروسهای بیماری زا در انسان قابلیت کشت در آزمایشگاه را ندارد. اما ترانسفکشن سلولهای کبدی با منشا انسانی بوسیله پلاسمید کد کننده ژنو
مقالهدنیای میکروب هافریده سادات سجادیان فرد، کارشناس ارشد، گروه میکروب شناسی، دانشکده علوم و فناوری های نوین، واحد علوم دارویی دانشگاه آزاد اسلامی-تهران پونه رحیمی، دانشیار، بخش هپاتیت و ایدز، انستیتو پاستور ایران، گروه ویروس شناسی پزشکی، تهران
سابقه و هدف: در سال های اخیر پروتئین جدیدی بنام core+1 گزارش شده است که به وسیله یک تغییر ریبوزومی 1+ در ناحیه کد کننده پروتئین core ویروس هپاتیت سی تولید می شود. این مطالعه با هدف طراحی و ساخت وکتور باکولوویروس واجد توالی core+1 hcv-2a (jfh1) تولید باکولوویروس نوترکیب و تایید تر
سابقه و هدف: در سال های اخیر پروتئین جدیدی بنام Core+1 گزارش شده است که به وسیله یک تغییر ریبوزومی 1+ در ناحیه کد کننده پروتئین Core ویروس هپاتیت سی تولید می شود. این مطالعه با هدف طراحی و ساخت وکتور باکولوویروس واجد توالی Core+1 HCV-2a (JFH1) تولید باکولوویروس نوترکیب و تایید تر