موتاسیون هدف مند، کلونینگ و بیان پروتئین استرپتوکیناز به منظور تولید مولکول جدید مناسب برای پگیلاسیون
سمیه باقری، somayeh bagheri department of biology, payame noor university, shahre rey, iran.گروه زیست شناسی، دانشگاه پیام نور، شهر ری، ایران. حسین مقصودی، hossein maghsoudi department of biology, payame noor university, shahre rey, iran.گروه زیست شناسی، دانشگاه پیام نور، شهر ری، ایران.سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه پیام نور تهران (payame noor university) فاطمه متولی، fatemeh motevalli department of hepatitis and aids, pasteur institute of iran, tehran, iran.، بخش هپاتیت و ایدز، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران.سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه پیام نور تهران (payame noor university) فرحناز خوشدل نظامیها، farahnaz khoshdel nezamiha research and development department, research and production complex, pasteur institute of iran, karaj, iran.بخش تحقیق و توسعه، مجتمع تولیدی تحقیقاتی، انستیتو پاستور ایران،کرج، ایران.سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (pasteur institute of iran) سید مهدی حسن زاده، seyed mehdi hasanzadeh research and ddevelopment department, research and production complex, pasteur institute of iran, karaj, iran.بخش تحقیق و توسعه، مجتمع تولیدی تحقیقاتی، انستیتو پاستور ایران، کرج، ایران.سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (pasteur institute of iran) رضا عربی میانرودی، reza arabi mianroodi research and ddevelopment department, research and production complex, pasteur institute of iran, karaj, iran.بخش تحقیق و توسعه، مجتمع تولیدی تحقیقاتی، انستیتو پاستور ایران، کرج، ایران.سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (pasteur institute of iran)
چکیده
زمینه و هدف: استرپتوکیناز رایج ترین و در حال حاضر مقرون به صرفه ترین داروی فیبرینولیتیک برای درمان سکته های قلبی و گرفتگی رگ ها می باشد. علی رغم مزایا و برتری هایی که استرپتوکیناز نسبت به داروهای ترومبولیتیک دیگر دارد، تجویز آن می تواند با مشکلاتی از جمله تحریک سیستم ایمنی بدن و هموراژی همراه بوده و هم چنین نیمه عمر نسبتا پایین آن منجر به درمان ناقص شود. پگیلاسیون یکی از روش های رایج برای اصلاح برخی از این معایب می باشد. مواد و روش ها: در تحقیق حاضر برای طراحی و تولید پروتئینی مناسب برای پگیلاسیون اختصاصی با سیستئین، نرم افزار spdbviewer استفاده شد. پس از انجام موتاسیون هدف مند به روش soeing pcr، ژن موتانت (sk45cys) و غیرموتانت (ski) به درون وکتور pet26-b وارد شده و ساختارهای حاصل به درون اشرشیاکلی ترنسفرم شدند. کلون های حاصل پس از رشد توسط iptg بیان شده و بیان پروتئین ها توسط sd-page و وسترن بلاتینگ بررسی گردید. پروتئین ها با تکنیک افینیتی کروماتوگرافی با ستونni-nta تخلیص شدند و فعالیت آن ها با استفاده از روش کروموژنیک و از طریق سوبسترای s2251 بررسی شد. یافته ها: نتایج حاصل از فعالیت سنجی نشان داد که فعالیت آمیدولیتیک sk45cys در مقایسه با ski، پس از 30 دقیقه از تشکیل کمپلکس با پلاسمینوژن، 10 درصد افزایش فعالیت داشته است. نتیجه گیری: نتایج نشان دادند که با توجه به سطحی بودن مکان سیستئین جایگزین شده و هم چنین افزایش نسبی فعالیت sk45cys این پروتئین می تواند مولکول مناسبی برای انجام فرآیند پگیلاسیون اختصاصی باشد.
مقالهمجله دانشگاه علوم پزشکی اراکمریم عزیزپور مغوان، maryam azizpour department of microbiology, science and research branch, islamic azad university, arak, iranگروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد اراک، ارک، ایران داود حسینی، davood hosseini razi vaccine and serum research institute, arak branch, arak, iranموسسه تحقیقات واکسن و سرمسازی رازی مرکزی، اراک، ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی اراک (islamic azad university of arak) حسین بصیری، hossein basiri department of microbiology, islamic azad university, arak branch, arak, iranﮔﺮوه ﻣﯿﮑﺮبﺷﻨﺎﺳﯽ، دانشگاه آزاد اسلامی واحد اراک، اراک، ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی اراک (islamic azad university of arak) ندا اکبری
زمینه و هدف: بروسلوز بیماری ناتوان کنندهای است که هزینه گزافی را بر اقتصاد و اجتماع تحمیل میکند. بنابراین استفاده از بهترین، دقیقترین و به صرفهترین روش برای تشخیص این بیماری ضروری میباشد. عامل شایع بروسلوز در ایران بروسلا بوده و پروتئین bp26این باکتری خاصیت آنتی ژنیسیته