مقاله

تکثیر، کلونینگ و بیان ژن bp۲۶((omp۲۸ brucellamelitensis بومی استان مرکزی به منظور تولید پروتئین نو ترکیب bp۲۶

چکیده

زمینه و هدف: بروسلوز بیماری ناتوان کننده‎ای است که هزینه گزافی را بر اقتصاد و اجتماع تحمیل می‎کند. بنابراین استفاده از بهترین، دقیق‎‎‎‎‎‎ترین و به صرفه‎ترین روش برای تشخیص این بیماری ضروری می‎باشد. عامل شایع بروسلوز در ایران بروسلا بوده و پروتئین bp26این باکتری خاصیت آنتی ژنیسیته خوبی دارد. بنابراین هدف از این تحقیق تولید پروتئین bp26 نوترکیب از باکتری بروسلا جهت استفاده در کیت تشخیص بروسلوز می‎باشد. مواد و روش‎ها: در این مطالعه ﺑﻨﯿﺎدی - ﮐﺎرﺑﺮدی، از باکتری کشت شده، تخلیص dna ژنومیک به روش پروتئیناز k و فنل/کلرفرم انجام شد. سپس با توجه به اطلاعات توالی ژن bp26 brucella melitensis موجود در بانک اطلاعات ژن، برای ژن مذکور پرایمر طراحی شده و واکنش زنجیره ای پلیمراز راه‎اندازی، بهینه‎سازی و انجام شد. در ادامه محصول واکنش ابتدا در وکتور ptz57r/t الحاق گردید و پس از آن در وکتور pet-28a کلون گردید. وکتور نو‎ترکیب به میزبان e. coli bl21(de3) منتقل گردید و پروتئین نوترکیب و با ستون کروماتو‎گرافی ni-nta علیه his tag تخلیص گردید. یافته‎ها: اندازه ژن تکثیر شده با اندازه بخشی از ژن bp26 brucella melitensis موجود در بانک اطلاعات ژن مطابقت داشت. ژن bp26 بدون القاء با iptg به میزان کم بیان شده و با افزودن آن به غلظت 1 میلی‎مولار به محیط کشت در ساعت سوم، حداکثر بیان مشاهده شد. نتیجه‎گیری: تولید پروتئین نوترکیب bp26 از باکتری ملیتنسیس بومی استان مرکزی با استفاده از ناقل پلاسمیدی pet-28a امکان‎پذیر گردید. با توجه به اهمیت این پروتئین و به منظور بررسی‎‎های بیشتر در آینده در خصوص تهیه کیت تشخیص بروسلوز، امکان تولید آن در کشور فراهم شد.

اسناد مشابه

  • تکثیر ،کلونینگ و بیان ژن نوترکیب bp۲۶( omp۲۸ )باکتری b‏. melitensisجدا شده از استان مرکزی و تخلیص پروتئین bp۲۶

    مقالهفصلنامه دامپزشکی و آزمایشگاهمریم عزیزپور مغوان1،سید داود حسینی2، حسین بصیری3، ندا اکبری 3، میترا نظام آبادی4 ، صابر اسکندری5، محسن ساریخانی6

    مقدمه و هدف: بروسلوز بیماری ناتوان کننده ای است که و هزینه گزافی را بر اقتصاد و اجتماع تحمیل می کند . بنابراین استفاده از بهترین ، دقیق ترین و به صرفه ترین روش برای تشخیص این بیماری ضروری می باشد . عامل شایع بروسلوز در ایران b. melitensis بوده و پروتئین bp26 این باکتری خاصیت آنتی

  • تکثیر ،کلونینگ و بیان ژن نوترکیب bp26( omp28 )باکتری B‏. Melitensisجدا شده از استان مرکزی و تخلیص پروتئین BP26

    مقاله۲۰۱۲فصلنامه دامپزشکی و آزمایشگاهمریم عزیزپور مغوان1،سید داود حسینی*2، حسین بصیری3، ندا اکبری 3، میترا نظام آبادی4 ، صابر اسکندری5، محسن ساریخانی6

    مقدمه و هدف: بروسلوز بیماری ناتوان کننده ای است که و هزینه گزافی را بر اقتصاد و اجتماع تحمیل می کند . بنابراین استفاده از بهترین ، دقیق ترین و به صرفه ترین روش برای تشخیص این بیماری ضروری می باشد . عامل شایع بروسلوز در ایران B. melitensis بوده و پروتئین BP26 این باکتری خاصیت آنتی

  • موتاسیون هدف مند، کلونینگ و بیان پروتئین استرپتوکیناز به منظور تولید مولکول جدید مناسب برای پگیلاسیون

    مقالهمجله دانشگاه علوم پزشکی اراکسمیه باقری، somayeh bagheri department of biology, payame noor university, shahre rey, iran.گروه زیست شناسی، دانشگاه پیام نور، شهر ری، ایران. حسین مقصودی، hossein maghsoudi department of biology, payame noor university, shahre rey, iran.گروه زیست شناسی، دانشگاه پیام نور، شهر ری، ایران.سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه پیام نور تهران (payame noor university) فاطمه متولی، fatemeh motevalli department of hepatitis and aids, pasteur institute of iran, tehran, iran.، بخش هپاتیت و ایدز، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران.سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه پیام نور تهران (payame noor university) فرحناز خوشدل نظامیها

    زمینه و هدف: استرپتوکیناز رایج ترین و در حال حاضر مقرون به صرفه ترین داروی فیبرینولیتیک برای درمان سکته های قلبی و گرفتگی رگ ها می باشد. علی رغم مزایا و برتری هایی که استرپتوکیناز نسبت به داروهای ترومبولیتیک دیگر دارد، تجویز آن می تواند با مشکلاتی از جمله تحریک سیستم ایمنی بدن و