مقاله

کلونینگ، بیان ژن، خالص سازی و تعیین خصوصیات آنزیم acc دآمیناز از باکتری سودوموناس فلورسنس**article uncorrected proof**

داود فرج زاده، نعمت سخندان-بشیر، ناصر پولادی

چکیده

گروهی از باکتری های همزیست با گیاهان، تحت عنوان pgpr (باکتری های محرک رشد گیاهان) آنزیمی به نام acc دآمیناز (ec4.1.99.4) را کد می کنند که این آنزیم، تنظیم کننده ی تولید اتیلن از طریق متابولیزه نمودن acc (حد واسط بیوسنتز اتیلن) و شکستن آن به آمونیاک و α-کتوبوتیرات می باشد. این آنزیم نقش مهمی در تسهیل رشد گیاهان از طریق کاهش میزان اتیلن بخصوص در شرایط سخت محیطی دارد. بنابراین هدف این مطالعه، بیان، تخلیص و تعیین شرایط بهینه ی فعالیت آنزیم acc-دآمیناز (accd) از سویه fy32 باکتری سودوموناس فلورسنس و بررسی خصوصیات سینتیکی این آنزیم می باشد. بدین منظور، ژن acds از باکتری سودوموناس فلورسنس بومی جداسازی و در وکتور بیانی pet28 a(+) کلون شد و سپس وکتور نوترکیب pet28-acds به باکتری e. coli سویه ی bl21(de3) منتقل گردید. پس از مشاهده بیان، آنزیم accd توسط ستون کروماتوگرافی تمایلی نیکل-سفاروز تخلیص و سپس، شرایط بهینه ی فعالیت این آنزیم و خصوصیات سینتیکی آن مورد بررسی قرار گرفت. مشخص گردید که این آنزیم، در 7 ph: و دمای 28 درجه سانتی گراد بیشترین فعالیت را دارد. این آنزیم فعالیت بالایی را در حضور mgso4 در مقایسه با سایر یون های فلزی مورد مطالعه نشان داد. همچنین کاهش فعالیت آنزیم در غلظت ppm 160 نمک nacl معنی دار بود. با توجه به پارامترهای سینتیکی آنزیم یعنی km (mm 66/9) و vmax (nm α-ketobutyrate mg-1 h-1 11/0)، مشخص گردید که کارایی این آنزیم در مقایسه با accdهای شناخته شده قبلی نسبتا بالاست.

اسناد مشابه

  • کلونینگ، بیان ژن، خالص سازی و تعیین خصوصیات آنزیم ACC دآمیناز از باکتری سودوموناس فلورسنس

    مقاله۲۰۱۵زیست فناوریداود فرج زاده، نعمت سخندان-بشیر، ناصر پولادی

    گروهی از باکتری‌های همزیست با گیاهان، تحت عنوان PGPR (باکتری های محرک رشد گیاهان) آنزیمی به نام ACC دآمیناز (EC4.1.99.4) را کد می‌کنند که این آنزیم، تنظیم کننده‌ی تولید اتیلن از طریق متابولیزه نمودن ACC (حد واسط بیوسنتز اتیلن) و شکستن آن به آمونیاک و α-کتوبوتیرات می‌باشد. این آنز

  • کلونینگ، بیان ژن، خالص سازی و تعیین خصوصیات آنزیم acc دآمیناز از باکتری سودوموناس فلورسنس

    مقالهزیست فناوریداود فرج زاده، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان نعمت سخندان-بشیر، دانشگاه تبریز ناصر پولادی، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان

    گروهی از باکتری های همزیست با گیاهان، تحت عنوان pgpr (باکتری های محرک رشد گیاهان) آنزیمی به نام acc دآمیناز (ec4.1.99.4) را کد می کنند که این آنزیم، تنظیم کننده ی تولید اتیلن از طریق متابولیزه نمودن acc (حد واسط بیوسنتز اتیلن) و شکستن آن به آمونیاک و α-کتوبوتیرات می باشد. این آنز

  • کلونینگ، بیان، خالص سازی و ارزیابی آنزیم لیزواستافین نوترکیب با استفاده از سیستم کلونینگ pbad

    مقالهمجله دانشگاه علوم پزشکی مازندرانعلیرضا مردادی، alireza mordadi msc student in medical microbiology, department of microbiology, faculty of medicine, hamedan university of medical sciences, hamedan, iranدانشجوی کارشناسی ارشد میکوب شناسی، گروه میکروب شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی همدان، همدان، ایران فهیمه حاجی احمدی، fahimeh haji ahmadi phd student in medical bacteriology, department of microbiology, faculty of medicine, hamedan university of medical sciences, hamedan, iranدانشجوی دکتری تخصصی باکتری شناسی، گروه میکروب شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی همدان، همدان، ایران سارا سلیمانی اصل، sara soleimani asl assistant professor, department of anatomy, faculty of medicine, hamedan university of medical sciences, hamedan, iranاستادیار، گروه آناتومی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی همدان، همدان، ایران محمدرضا عربستانی

    سابقه و هدف: استافیلوکوک اورئوس یک پاتوژن مهم بیمارستانی بوده و باعث ایجاد بیماری هایی همچون اندوکاردیت، استئومیلیت، پنومونی، سندرم شوک سمّی و مسمومیت غذایی می گردد. امروزه استفاده بیش از حد و نامناسب از آنتی بیوتیک ها در درمان این بیماری ها باعث مقاومت این ارگانیسم به بسیاری از

  • کلونینگ، بیان، خالص سازی و ارزیابی آنزیم لیزواستافین نوترکیب با استفاده از سیستم کلونینگ pBAD

    مقاله۲۰۱۵مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندرانعلیرضا مردادی، فهیمه حاجی احمدی، سارا سلیمانی اصل، محمدرضا عربستانی

    سابقه و هدف: استافیلوکوک اورئوس یک پاتوژن مهم بیمارستانی بوده و باعث ایجاد بیماری‌هایی همچون اندوکاردیت، استئومیلیت، پنومونی، سندرم شوک سمّی و مسمومیت غذایی می‌گردد. امروزه استفاده بیش از حد و نامناسب از آنتی‌بیوتیک‌ها در درمان این بیماری‌ها باعث مقاومت این ارگانیسم به بسیاری از

  • کلونینگ ، بیان ژن، خالص سازی و تعیین خصوصیات آنزیم الاستاز حاصل از باکتری سودوموناس آئروجینوزا

    مقالهمجله تازه های بیوتکنولوژی سلولی - مولکولیسمیه احتشام، somayeh ehtesham ehtesham department of biology, faculty of sciences, islamic azad university, parand branch,tehran-iranگروه زیست شناسی ، دانشکده علوم زیستی ، دانشگاه آزاد اسلامی واحدپرند، تهران،ایران سید محسن اصغری، s. mohsen asghari department of biology, faculty of science, university of guilan, guilan -iranگروه زیست شناسی ، دانشکده علوم پایه ، دانشگاه گیلان، گیلان، ایران افسانه صدر ممتاز، afsaneh sadre momtaz department of biology, faculty of science, university of guilan, guilan -iranگروه زیست شناسی ، دانشکده علوم پایه ، دانشگاه گیلان، گیلان، ایران

    سابقه و هدف: الاستاز حاصل از سودوموناس آئروجینوزا یک آنزیم مهم در زمینه مطالعات بنیادی بر روی zn-متالوپروتئازها و نیز بعنوان فاکتور ویرولانس این باکتری مطرح است. در این مطالعه ژن مربوط به آنزیم الاستاز از سودوموناس آئروجینوزا (pae) استخراج و کلون شده و پس از بیان و تخلیص، خصوصیات

  • کلونینگ ، بیان ژن، خالص سازی و تعیین خصوصیات آنزیم الاستاز حاصل از باکتری سودوموناس آئروجینوزا

    مقاله۲۰۱۲مجله تازه های بیوتکنولوژی سلولی - مولکولیسمیه احتشام، سید محسن اصغری، افسانه صدر ممتاز

    سابقه و هدف: الاستاز حاصل از سودوموناس آئروجینوزا یک آنزیم مهم در زمینه مطالعات بنیادی بر روی Zn-متالوپروتئازها و نیز بعنوان فاکتور ویرولانس این باکتری مطرح است. در این مطالعه ژن مربوط به آنزیم الاستاز از سودوموناس آئروجینوزا (PAE) استخراج و کلون شده و پس از بیان و تخلیص، خصوصیات