مقاله

ابداع روشی کم هزینه و دقیق برای خالص سازی فاکتور رشد اپیدرمی انسانی نوترکیب (hegf)

چکیده

فاکتور رشد اپیدرمی(egf) انسانی با 53 اسید آمینه و وزن مولکولی 2/6 کیلو دالتون، پروتئینی با قابلیت تحریک رشد چندین نوع سلول است و به دلیل همین ویژگی در موارد پزشکی و تهیه فراورده­ های آرایشی کاربردهای بسیاری دارد. در این پژوهش، ابتدا پلاسمید pet23a(+) حاوی ژن egf به باکتری اشرشیاکلی سویه bl21(de3) منتقل شد که سویه نوترکیب به دست آمده قادر به تولید فاکتور رشد اپیدرمی انسانی به صورت درون ریز بود. روند خالص­ سازی استفاده شده در این پژوهش، روشی آسان و به صرفه و دارای سه مرحله اصلی شامل بازکردن تاخوردگی مولکولی و واسرشتگی مولکول ها، خالص­ سازی پایانی به روش فراتصفیه و ایجاد تاخوردگی دوباره مولکول های جداشده می باشد. در این پژوهش، از روش کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا در ستون فاز وارون در کنار آزمایش sds-page برای سنجش نتیجه­ های مرحله­های گوناگون خالص­سازی استفاده شد. درآخرین مرحله خالص ­سازی نتیجه­ه ای هردو آزمایش نشان دهنده خلوص بالا برای پروتئین جداشده می باشد.

اسناد مشابه