طراحی کاست ژنی، کلونینگ و بیان پلی پپتید شبه الاستین نوترکیب به منظور تولید بیومتریال کاربردی در مهندسی بافت

محمدرضا سلیمان، mohammad reza soleyman basic science dept., khomein branch, islamic azad university, khomein, iranگروه علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد خمین، خمین، ایران مصطفی خلیلی، mostafa khalili blood transfusion research center, high institue for research and education in transfusion medicine, tehran, iranمرکز تحقیقات انتقال خون، موسسه عالی آموزش و پژوهش در طب انتقال خون، تهران، ایران علیرضا سلیمان میگونی، alireza soleyman meigoni basic science dept., khomein branch, islamic azad university, khomein, iranگروه علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد خمین، خمین، ایران هادی محمدزاده قاشقایی، hadi mohammadzadeh ghasghaii basic science dept., khomein branch, islamic azad university, khomein, iranگروه علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد خمین، خمین، ایران ادیب زنده دل، adib zendedel dept. of anatomy, school of medicine, rasht university of medical sciences, rasht, iranگروه علوم تشریح، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گیلان، رشت، ایران مریم باعزم، maryam baazm dept. of anatomy, school of medicine, arak university of medical sciences, arak, iranگروه علوم تشریح، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایران

چکیده

سابقه و هدف: پلی پپتید شبه الاستین (elastin-like polypeptide, elp) بیومتریال مصنوعی برگرفته از توالی پنتاپپتید val-pro-gly-xaa-gly (vpgxg) الاستین ماتریکس خارج سلولی (ecm) است. پلیمرهای پروتئینی که از واحدهای تکراری اسیدهای آمینه طبیعی و غیرطبیعی پدید می آیند، به عنوان رده ای جدید از بیومواد شناخته می شوند. ویژگی های منحصر به فرد elp همانند تولید بر پایه بیان ژنتیکی در انواع رده های میزبانی (به عنوان مثال باکتری ها و سلول های یوکاریوت)، تحریک پذیری تحت تاثیر عوامل محیطی، زیست سازگاری و زیست تخریب پذیری مولکول های elp باعث جذابیت استفاده از آن در بیوتکنولوژی و پزشکی می گردد. مواد و روش ها: در این مطالعه، الیگومریزاسیون ساختار ژن 330 جفت باز مونومری grgds-elp (بیان کننده 21 پنتاپپتید) تا تولید ژن تریمر 990 جفت بازی (بیان کننده 63 پنتاپپتید فیوژن) درون وکتور کلونینگ puc انجام گرفت. پس از تایید ساختار ژنی با سکوئنسینگ، ساختار ژنی به وکتور بیانی mod-pet ساب کلون گشته و به میزبان e.coli انتقال یافت. یافته ها: بیان پروتئین نوترکیب توسط iptg القاء گشت و صحت پروتئین نوترکیب توسط page-sds و وسترن بلاتینگ تایید گردید. نتیجه گیری: با روش به کار رفته elp جهت مطالعات بعدی به دست آمد