افزایش قدرت سولفورزدایی بیولوژیک از طریق کلونینگ و بیان ژن اکسیدوردوکتاز بدست آمده از باکتری رودوکوکوس اریتروپولیس igts۸ با استفاده از وکتور بیانی pet۲۱a

جمشید راهب، j. raheb national institute for genetic engineering and biotechnology (nigeb), tehran, iranپژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری الهام آقایی مقدم، e. aghaei national institute for genetic engineering and biotechnology (nigeb), tehran, iranپژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری حدیث بهزادی، h. behzadi national institute for genetic engineering and biotechnology (nigeb), tehran, iranپژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

Abstract(in Persian; no English abstract is available)

سابقه و هدف: بیودسولفوریزاسیون یک روش میکروبی است که طی آن با استفاده از سویه های بهینه شده باکتریایی سعی در افزایش توان قدرت گوگردزدایی از ترکیبات نفتی می شود، یکی از روش های موثر استفاده از ژن های اکسیدوردوکتاز افزایش یافته می باشد که fmnh2 مورد نیاز برای فعالیت ژن های گوگردزدایی را در دسترس قرار می دهند. در این مطالعه ژن اکسیدوردوکتاز باکتری رودوکوکوس اریتروپولیس igts8 که به عنوان یک سویه مدل در تحقیقات گوگردزدایی مطرح است با استفاده از تکنیک pcr بدست آمد. سپس برای بدست آوردن بیان بالاتر از وکتور بیانی pet21a استفاده شد. مواد و روش ها: پلاسمید نوترکیب ptz57 or از باکتری ecoli-dh5α استخراج و توسط آنزیم های محدود کننده ecorι وhindιιι برش داده شد که ژن اکسیدوردوکتاز به طول bp 600 جدا شد سپس در وکتورهای بیانی مختلف pkk و pet-21a کلون گردید و برای بررسی بیان سیتوپلاسمی پروتئینی مورد نظر پس از القاء با iptg در زمان های مختلف بر روی ژل آکریل آمید برده شد. یافته ها: پس از تایید وجود ژن اکسیدوردوکتاز در پلاسمید ptz57r بوسیله pcr این ژن در وکتور بیانی pkk کلون شد که در شرایط القایی یک باند ضعیف بر روی ژل sds-page درناحیه kda 25 نشان داد. که برای بدست آوردن بیان بالاتر از وکتور pet-21a استفاده شد که باند شارپی را در همان ناحیه نشان داد. نتیجه گیری: جداسازی کلونینگ و بیان انبوه ژن اکسیدوردوکتاز در باکتری ecoli منجر به افزایش قدرت بیان ژن های گوگردزدائی در سویه های مهندسی شده می شود.