تأثیر فلز کبالت بر سینتیک و ساختار آنزیم تایروزیناز قارچ خوراکی
Abstract(in Persian; no English abstract is available)
مقدمه و هدف: تایروزیناز به عنوان یک آنزیم مؤثر در سطوح متفاوت حیات نشان داده شده است. این اهمیت هم از نظر عملکرد و هم از نظر ساختار و پایداری آنزیم مهم است. تنوع سوبسترایی آنزیم، امکان بررسی لیگاندهای متفاوت روی سینتیک آنزیم در هر دو فعالیت کاتکولازی و کرزولازی را فراهم می کند. عملکرد سینتیکی پیچیده آنزیم و نیز فعالیت و ساختار آن در این دو واکنش پی درپی از نظر مکانیسمی هنوز به خوبی شناخته نشده است. هدف: تعیین تأثیر فلز کبالت بر سینتیک و ساختار آنزیم تایروزیناز قارچ خوراکی مواد و روش کار: در این مطالعه، ساختار آنزیم با استفاده از تکنیکهای دو رنگنمایی حلقوی ( cd ) و فلوئورسانس و نیز فعالیت سینتیکی آن با استفاده از سوبسترای طبیعی کافئیک اسید در حضور یون فلزی co2 + با غلظتهای صفر، 2/0، 6/0 و 9/0 میلیمولار و در ph برابر 6، 7، 8 و 9 بررسی شد. ثابت های α و β که تأثیر فعالکننده برروی آنزیم و تمایل آن به سوبسترا را نشان میدهند با ترسیم منحنیهای ثانویه لاینووربرک برای آنزیم و co2 + به دست آمدند. نتایج: سینتیک فعالسازی آنزیم تایروزیناز برای یون فلزی فوق از الگوی فعالکننده غیرضروری پیروی کرد. مقادیر α (1α <) نشان میدهد، پیوند لیگاند فلزی با آنزیم باعث افزایش تمایل سوبسترا به آن میشود. مقادیر β (1<β ) نیز نشان میدهد، پیوند سوبسترا به آنزیم میتواند تسریع حداکثر سرعت آنزیم را از طریق افزایش ثابت کاتالیتیکی آنزیم ( kcat ) به دنبال داشته باشد. بیشترین فعالیت آنزیم در عدم حضور یون co2 + در ph برابر هفت به دست آمد. بررسی ساختاری آنزیم با تکنیکهای فلوئورسانس و بیضی واری حلقوی نشان داد، در ph برابر 9، co2 + چه از نظر ساختار دوم و چه ساختار سوم پایداری آنزیم را به دنبال دارد. نتیجهگیری : به طور خلاصه، نتایج حاصل از مطالعات سینتیکی و ساختاری آنزیم، الگوی فعالسازی غیرضروری آنزیم را توسط لیگاند فلزی co2 + نشان داد. پیوند احتمالی این لیگاند در نزدیکی موضع فعال، فعالسازی آنزیم را از طریق اثر آلوستریکی به دنبال خواهد داشت. از طرفی لزوماً شرایط مناسب فعالیت آنزیم همان شرایط مناسب پایداری آنزیم نخواهد بود.