شناسایی و تشخیص ویروس موزاییک معمولی لوبیا و موزاییک نکروتیک معمولی لوبیا با استفاده از روش immunocapture rt-pcr

نگیسا سالاری، nagisa salari plant protection group, varamin agricultural collegeگروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی ورامین مریم سید موسوی، maryam seyed musavi microbiology department, college of biological sciences, alzara universityگروه میکروبیولوژی ، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه الزهرا نوح شهر آئین، noooh shahraeen plant virus research department, iranian research institute for plant protection-tehranبخش تحقیقات ویروس شناسی گیاهی- مؤسسه تحقیقات گیاهپزشکی کشور شیرین قربانی، shirin ghobani plant protection group, varamin agricultural collegeگروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی ورامین مژده ملکی، mojdeh maleki microbiology department, college of biological sciences, alzara universityگروه میکروبیولوژی ، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه الزهرا

Abstract(in Persian; no English abstract is available)

سابقه و هدف: در بین عوامل ویروسی متعددی که باعث بروز علایم موزاییک و ایجاد خسارت در گیاه لوبیا چیتی (phaseolus vulgaris l. ) میشوند، دو ویروس موزاییک معمولی لوبیا bcmv و ویروس موزاییک نکروتیک لوبیا bcmnv اهمیت ویژه ای دارند . به منظور ردیابی این دو ویروس و تعیین برخی خصوصیات سرولوژیک و مولکولی آنها، در یک فصل زراعی نمونه هایی با علایم موزاییک ، رگبرگ روشنی ، برگشتگی ، نکروتیک برگ و ساقه لوبیا جمع آوری گردید. مواد و روش ها: به منظور ردیابی این دو ویروسدر ابتدا نمونه ها با روشهای سرولوژیکdas-elisa و لکه گذاری بافتی (tissue-blot) با آنتی سرم های چند همسانه ای اختصاصی مورد سنجش و ردیابی قرار گرفتند. سپس جهت تأیید و بررسی دقیق تر ، نمونه های انتخابی آلوده در الایزا با آزمون ic-rt-pcr مورد ارزیابی قرار گرفتند یافته ها: cdna بدست آمده در دستگاه ترموسایکلر تکثیر گردید. محصول حاصل در ژل آگاروز الکتروفورز شد..باند حاصل به اندازه تقریبی 373 باز و 683 باز از سکانس منطقه ای از ژن پروتئین پوششی ویروس مورد نظر به ترتیب برای ویروس موزاییک معمولی و ویروس موزاییک نکروتیک معمولی لوبیا مشاهده گردید.. با بکارگیری تکنیک ic-rt-pcr وبر اساس مقایسه سایز باند های ایجاد شده در این روش ،دو ویروس مذکور ازگیاهان لوبیای آلوده مناطق اراک ، نیشابور ، زنجان وکرج شناسایی و تفکیک گردید. نتیجه گیری:ویروس موزاییک معمولی و موزاییک نکروتیک معمولی لوبیا بطور گسترده ای در اغلب مناطق کشت و کار لوبیا در ایران پراکنده هستند. و در بعضی اوقات نیز به طور مشترک و تواما گیاه لوبیا را آلوده میسازند. نشان داده شده که تکنیک ic-rt-pcr برای شناسایی و تشخیص این دو ویروس از حساسیت بالایی نسبت به روش الایزا بر خوردار است. در این تکنیک بکارگیری همزمان و مخلوطی از آنتی سرم اختصاصی ویروس و پرایمر های مربوطه با عث شناسایی و تفکیک همزمان دو ویروس در صورت آلودگی توام خواهد شد .