تولید روتاویروس گاوی بازآرایی شده از طریق تکثیر آن با نسبت بالای عفونتزایی ویروس به سلول در کشت سلول و تکثیر ژنهای غیر ساختمانی با روش rt-pcr
Abstract(in Persian; no English abstract is available)
هدف: گروه a روتاویروس، مهمترین عامل ویروسی گاستروانتریت و اسهال شدید در نوزادن و کودکان و مسئول حدود 600 تا 870 هزار مرگ در سال است، بنابراین تشخیص و درمان این بیماری از اهمیت ویژهای برخوردار است. بازآرایی ژنها طی پاساژهای متوالی ویروس با نسبت بالای عفونتزایی در کشت سلول و همچنین در عفونتهای مزمن در بیماران با نقص ایمنی تشخیص داده شده است. در این مطالعه روش rt-pcr برای ردیابی، تشخیص و تکثیر ژنهای روتاویروس استاندارد و بازآرایی شده راهاندازی شده است. مواد و روشها: rna روتاویروس از رده سلولی ma-104 آلوده استخراج شد و حضور ژنوم توسط الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید 10 درصد و رنگآمیزی نیترات نقره، مشخص شد. تکثیر توالی کامل ژنهای کد کننده nsp1, 2, 3، با واکنش rt-pcr، برای روتاویروس استاندارد و بازآرایی شده، با آغازگرهای اختصاصی انجام گرفت. نتایج: بازآرایی در ژنهای nsp1, 3 با تغییر الگوی مهاجرت این قطعات در ژل، توسط الکتروفورز در ژل پلی آکریل آمید نشان داده شد. طول کامل محصولات ژنهای کد کننده nsp1, 2, 3 برای روتاویروس استاندارد و بازآرایی شده تکثیر شد و برای تعیین توالی ارسال شد. نتایج، شکلگیری قطعات ژنومی بازآرایی شده، طی پاساژ متوالی روتاویروس گاوی سویه rf را نشان داد. نتیجهگیری: تکثیر متوالی ویروس با نسبت بالای عفونتزایی در کشت سلول و همچنین عفونتهای مزمن در گروههای هدف با نقص ایمنی در تکامل آن نقش دارد و از طرف دیگرروشهای استفاده شده برای تعیین ویژگی به طور مداوم در حال تحول و تعریف مجدد است. با در نظر گرفتن تحقق موفقیت مطالعات روتاویروس و اهمیت زیاد توسعه واکسنهای روتاویروسی، مطالعه بیشتر جزئیات بازآرایی و جمعآوری داده برای فهم بهتر ویژگیهای آنتیژنیک و مولکولی ویروس لازم است. مطالعه حاضر اهمیت تنوع ژنتیکی را نشان داده و میتواند اطلاعات ارزشمندی در زمینه تکثیر، تنوع، زیستشناسی و تکامل روتاویروس را فراهم نماید.