کلون کردن ژن (ifn-?1)il-29انسانی از سلولهای دندریتیک مشتق از مونوسیت و بیان پروتئینی آن در سلولهای یوکاریوتی hek 293 t
چکیده
اینترفرون های نوع سه یکی از اعضای جدید خانواده اینترفرونی هستند که دارای سه لیگاند می باشند: ifn-?1(il-29)، ifn-?2(il-28a) و ifn-?3(il-28b). این سه لیگاند، گیرنده هترودایمر منحصر به فرد یکسانی را بکار می برند که از زنجیره های crf2-12، و crf2-4 تشکیل یافته که کاملاً از گیرنده های اینترفرون های نوع یک و دو متفاوت می باشند. اینترفرون های لامبدا چندین خصوصیت از جمله فعالیت های ضد ویروسی، ضد تکثیری، ایمونومدولاتوری و فعالیت ضد توموری در in vivo را نشان می دهند. مواد و روشها: rna تام از سلول های دندریتیک مشتق شده از مونوسیت تحریک شده با lps استخراج گردید. cdna کد کننده il-29 انسانی توسط rt-pcr تکثیر و به درون وکتور pcdna3.1+ منتقل شد. وکتور نوترکیب حاصل به داخل سلول های t hek293 توسط لیپوفکتامین ترانسفکت گردید. برای بررسی پروتئین il-29 بیان شده، الیزای ساندویچی استفاده شد. نتایج: توالی dna وارد شده مشابه با توالی کد کننده il-29 موجود در gene bank بود. ژن il-29 بطور قابل توجهی در سلول های ترانسفکت شده رونویسی و بیان آن در سلول های t hek293 توسط الیزای ساندویچی تأئید گردید. بحث: کلونینگ و بیان موفق il-29 می تواند نخستین گام برای مطالعات بیستر درباره فعالیت های دیگر il-29 و کسب روش های درمانی مفید برای سرطان، عفونت های ویروسی، بیماری های خود ایمنی و آلرژی و همچنین برای طراحی واکسن های موثرتر بکار رود.