به کارگیری تست lamp و pcr برای تشخیص ویروس هرپس سیمپلکس تیپ یک
چکیده
همچنان عفونت با هرپس سیمپلکس ویروس ها، به عنوان یک مسأله ی جهانی که تهدیدکننده-ی سلامت افراد است، باقی مانده است. به طوری که مادران حامله بدون علامت می توانند توسط این ویروس باعث انسفالیت مرگبار در جنین خود گردند. بیماری های متعددی توسط تیپ یک این ویروس ایجاد می گردد که مهم ترین آن انسفالیت در نوزادان می باشد که هدف این مطالعه، توسعه ی یک تکنیک سریع، آسان و دارای حساسیت و ویژگی بالا برای تشخیص این ویروس در مایع مغزی نخاعی می باشد. در این مطالعه، روش lamp (loop mediated isothermal amplification) به عنوان یک تکنیک سریع با حساسیت و ویژگی بالا، برای تشخیص ویروس hsv-1 در نمونه های مایع مغزی نخاعی آلوده به این ویروس راه اندازی شد. ابتدا، این ویروس در محیط کشت سلولی رشد داده شد و بعد از استخراج ژنوم آن، از قطعه ای از ژنوم به عنوان کنترل مثبت استفاده گردید؛ جهت بررسی کار، 18 نمونه ی اخذشده از کودکان زیر هفت سال مبتلا به انسفالیت هرپس ویروسی تیپ یک بستری در بیمارستان های دی تهران و نمازی شیراز جمع آوری گردید. حساسیت و ویژگی تست در تشخیص ویروس hsv-1 به ترتیب copies/tube 500 و 9/99 درصد به ترتیب بود. تشخیص مثبت بودن در این تست از طریق الکتروفورز در ژل آگاروز 5/1 درصد و یا بررسی چشمی کدورت در لوله صورت گرفت؛ در نهایت، داده های به دست آمده با نتایج حاصل از real-time pcr و pcr مقایسه گردید که نشان داد نتایج تا حدود زیادی با یکدیگر مطابقت دارند. در این مطالعه، تکرارپذیری و قابلیت اعتماد واکنش lamp در ارتباط با تشخیص ویروس hsv-1 بررسی و مورد تأیید نهایی قرار گفت؛ نتایج نشان دادند که این روش به عنوان تکنیکی ساده، ارزان و سریع می تواند در آینده مورد استفاده های بیشتری در تشخیص بیماری های عفونی به ویژه ویروس ها خصوصاً در مناطق محروم قرار گیرد.