پایان‌نامه

ارزیابی ایمنی زایی پلاسمید کدکننده پروتئین میکرونم (mic3) توکسوپلاسما گوندی درموش balb/c

محمد جعفری مدرک

چکیده

توکسوپلاسما گوندی یک انگل تک یاخته ای داخل سلولی است که موجب بیماری توکسوپلاسموز در انسان و حیوان میشود. انگل انتشارجهانی داشته و حدودیک سوم از انسانها سرم مثبت هستند. عفونتهای توکسوپلاسمایی در اکثر افراد سالم فاقد علامت بوده ولی در افراد با سیستم ایمنی ضعیف علائم شدیدتری ایجاد می کند. انگل توکسوپلاسما همانند سایر ارگانیسم های تک سلولی متشکل از آنتی ژنهای ایمنوژنیک فراوانی است. با وجود اینکه ممکنست آنتی ژنهای دفعی – ترشحی بهترین نوع آنتی ژن برای تحریک پاسخهای ایمنی سلولی و در نتیجه کاندید مناسبی برای تهیه واکسن بر علیه توکسوپلاسموز باشند ولی مطالعات اندکی بر روی آنها انجام شده است. در این مطالعه ما پروتئین میکرونم3(mic3) توکسوپلاسما گوندی را بصورت dna واکسن تهیه نموده و مورد ارزیابی قرار دادیم. در این تحقیق پس از استخراج dna ژنومی از انگل به روش فنل-کلروفرم و جداسازی و تکثیر ژن کد کننده mic3 با روش pcr، محصول pcr در ptz57r/t کلون گردیده و سپس تعیین توالی شد. نتایج نشان داد که که قطعه bp1052 در پلاسمید مذکور کلون شده و قطعه کلون شده ژن mic3 توکسوپلاسما گوندی است. ژن کلون شده ازنظر توالی نوکلئوتیدی با شماره jf330835.1 استرین rh 100% و با شماره aj132530.1 همین استرین 98% شباهت دارد. سپس این ژن در pcdna3 ساب کلون گردیده و بعد از ترانسفکت کردن این پلاسمید نو ترکیب در سلول یوکاریوتیک( cho ) بیان این ژن به روشsds-page و western blotting تایید شد. در این مطالعه به منظور بررسی پاسخهای ایمنی هومورال و سلولی 70 موش balb/c ماده inbred با پلاسمید حاوی این ژن ایمن سازی شدند. ایمونیزاسیون 3 بار به فواصل 3 هفته ای انجام شد. نتایج بدست آمده نشان داد که میزان بقاء موش ها یی که با پلاسمید ریکامبینانت ایمن سازی شدند با گروه کنترل اختلاف معنی دار دارند. اندازه گیری igg و اندازه گیری ایزوتایپ igg2a نیز اختلاف معنی دار را بین گروههای مورد و کنترل تایید کرد(p?0.05). اندازه گیری ifn-? نشان دهنده مقادیر بالایی از این سایتوکائین بوده ولی اندازه گیری il4 نشان دهنده مقدار پایین این سایتوکائین است. با توجه به نتایج، dna واکسن حاوی ژن mic3 قادر به ایجاد مقاومت بر علیه توکسوپلاسما می باشد. همچنین یافته های این مطالعه نشان داد که استفاده از آدجوانت ژنتیکی il- 12همراه با dna واکسن حاوی mic3 تغییر معنی دار در پاسخهای ایمنی در بعضی گروه ها ایجاد می کند.

اساتید راهنما و مشاور

فاطمه غفاری فر، عبدالحسین دلیمی اصل

پایان‌نامه‌های مشابه

اسناد مشابه

  • ارزیابی ایمنی‏زایی پلاسمید کدکننده ژن کامل راپتری-۲ توکسوپلاسما گوندی در موش‏های balb/c

    مقالهپژوهش های آسیب شناسی زیستیkami hoseinian khosroshahi، department of parasitology, faculty of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran fatemeh ghaffarifar، associated professor, department of parasitology, faculty of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran zohre sharifi، assistant professor, research center of iranaian blood transfusion organization, tehran, iran sashila desouza

    هدف: توکسوپلاسما گوندی یک انگل تک‏یاخته ای داخل سلولی است که موجب بیماری توکسوپلاسموزیز در انسان و حیوان می شود. در سال‏های اخیر پیشرفت چشمگیری در زمینه شناخت کاندیدهای مناسب واکسن که باعث القای پاسخ‏های ایمنی مؤثر می شود، صورت گرفته است. در این مطالعه، از ژن کامل راپتری-2 توکسوپ

  • ارزیابی ایمنی زایی پلاسمید کد کننده آنتی ژن gra۵ توکسوپلاسما گوندی در موش balb/c

    مقالهفیضراضی ناصری فر، razi naserifar فاطمه غفاری فر، fatemeh ghaffarifar department of medical parasitology and entomology, faculty of medicine, tarbiat modares university,تهران، دانشگاه تربیت مدرس، دانشکده علوم پزشکی، گروه انگل شناسی عبدالحسین دلیمی اصل، abdolhossein dalimi-asl زهره شریفی

    سابقه و هدف: عوارض توکسوپلاسموز ضرورت یافتن واکسن مؤثری علیه این بیماری را مطرح می سازد. ایمن سازی با پلاسمید نوترکیب حاوی ژن های کد کننده پروتئین های محافظت کننده، راه کاری امید بخش برای ساخت واکسن به شمار می آید. تحقیق حاضر با هدف ارزیابی ایمنی زایی پلاسمید کد کننده آنتی ژن gra

  • ارزیابی ایمنی زایی پلاسمید کد کننده آنتی ژن GRA5 توکسوپلاسما گوندی در موش BALB/c

    مقاله۲۰۱۲فیضراضی ناصری فر، فاطمه غفاری‌فر، عبدالحسین دلیمی‌اصل، زهره شریفی

    سابقه و هدف: عوارض توکسوپلاسموز ضرورت یافتن واکسن مؤثری علیه این بیماری را مطرح می‌سازد. ایمن‌سازی با پلاسمید نوترکیب حاوی ژن‌های کد کننده پروتئین‌های محافظت کننده، راه‌کاری امید بخش برای ساخت واکسن به‌شمار می‌آید. تحقیق حاضر با هدف ارزیابی ایمنی‌زایی پلاسمید کد کننده آنتی‌ژن GRA

  • کلونینگ و توالی یابی پلاسمید کد کننده پروتئین میکرونم 3 (MIC3) توکسوپلاسما گوندی

    مقاله۲۰۱۱فیضمحمد جعفری مدرک، فاطمه غفاری فر، زهره شریفی، عبدالحسین دلیمی اصل

    سابقه و هدف: توکسوپلاسما گوندی، انگل تک‌یاخته درون سلولی اجباری و عامل توکسوپلاسموزیس در انسان و حیوانات بوده که در سراسر جهان انتشار دارد. پروتئین میکرونم 3 (3MIC (با وزن ملکولی 90 کیلو دالتون، عامل چسبیدن انگل به سلول‌های میزبان در آغاز تهاجم است و در تمام مراحل تکاملی از انگل

  • کلونینگ و توالی یابی پلاسمید کد کننده پروتئین میکرونم ۳ (mic۳) توکسوپلاسما گوندی

    مقالهفیضمحمد جعفری مدرک، mohamad jafari-modrek فاطمه غفاری فر، fatemeh ghaffarifar department of parasitology, faculty of medicine, tarbiat modares university of medical sciences, tehran, i.r. iranتهران ، بزرگراه جلال آل احمد،پل گیشا، دانشگاه تربیت مدرس، گروه انگل شناسی زهره شریفی، zohreh sharifi عبدالحسین دلیمی اصل

    سابقه و هدف: توکسوپلاسما گوندی، انگل تک یاخته درون سلولی اجباری و عامل توکسوپلاسموزیس در انسان و حیوانات بوده که در سراسر جهان انتشار دارد. پروتئین میکرونم 3 (mic3) با وزن ملکولی 90 کیلو دالتون، عامل چسبیدن انگل به سلولهای میزبان در آغاز تهاجم است و در تمام مراحل تکاملی از انگل ت