بررسی بیان آنزیم بتا گالاکتوزیداز باکتری باسیلوس سوبتیلس بر سطح اسپور این باکتری به منظور تولید بیوکاتالیست
چکیده
در سال های اخیر استفاده از آنزیم های میکروبی به هر دو فرم آزاد یا متصل به یک تکیه گاه (حامل) کاربردهای فراوانی در زمینه های بیوتکنولوژی ، پزشکی و صنعتی داشته است. تثبیت آنزیم ها باعث ایجاد پایداری، بالا رفتن عملکرد انتخابی آنزیم و اطمینان از بازیافت و توانایی استفاده مجدد از آنزیم تولیدی می باشد. با در نظر گرفتن این نکات و اینکه هدف اصلی صنایع استفاده از آنزیم ها و تکنیک هایی است که از نظر اقتصادی مقرون به صرفه باشد، تکنیک بیان سطحی می تواند سطحی را برای اتصال پروتئین ها ایجاد که از نظر اقتصادی برای مصارف صنعتی مقرون به صرفه باشد. با استفاده از این تکنیک و روش های مهندسی ژنتیک پروتئین مورد نظر بر روی دیواره یا همان سطح سلول (از جمله باکتری) بیان می شود. با توجه به اینکه استفاده از سلول محدودیت هایی را در کاربردهای صنعتی ایجاد می کند، حامل جدیدی که امروزه نظر محققان را به خود جلب کرده استفاده از اسپور باکتری ها به خصوص اسپور باسیلوس سوبتیلیس بدلیل بی خطر بودن آن می باشد. اسپور از لحاظ متابولیکی غیرفعال و به عبارتی فرم نهفته و خفته سلول باکتری می باشد. این ساختار می تواند در برابر طیف وسیعی از محرکات خارجی که می تواند سلول رویشی را ازبین ببرند ، مقاومت کند. . بیان در سطح اسپور بر پایه ساخت کایمرهای ژنی یک dna هترولوگ و یک ژن باسیلوسی رمز کننده پروتئین پوشش اسپور استوار است. . آنزیم بتا گالاکتوزیداز در صنایع شیری برای تجزیه لاکتوز شیر به گلوکز و گالاکتوز به منظور تولید محصولات لبنی بدون لاکتوز برای افرادی که قادر به تجزیه لاکتوز نمی باشند، از ارزش و کاربرد فراوانی برخوردار است. استفاده از آنزیم بتا گالاکتوزیداز در صنایع با محدودیتهایی از قبیل هزینه زیاد تولید، پایداری و مقاومت کم و عدم توانایی در بازیافت این آنزیم مواجه می باشد. در این تحقیق با استفاده از کایمر ژنی توالی آنزیم بتا گالاکتوزیداز باسیلوس سوبتیلیس (laca) و توالی رمز کننده یکی از پروتئین های پوششی اسپور (cotc)، آنزیم بتا گالاکتوزیداز بر سطح اسپور این باکتری با هدف تولید بیوکاتالیستی که واکنش هیدرولیز لاکتوز به گلوکوز و گالاکتوز را تسهیل می کند، تثبیت شد.
