پایان‌نامه

بررسی تنوع باکتریوفاژهای کدکننده انتروتوکسین ها در میان جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین

فاتح رحیمی

دانلود متن کاملرایگان، با حساب کاربری؛ ثبت نام با گوگل چند ثانیه است

چکیده

استافیلوکوکوس اورئوس باکتری بیماری زای انسانی و دامی است که به عنوان بیماری زای بیمارستانی و همچنین اکتسابی از جامعه شناخته می شود که واجد طیف وسیعی از باکتری خوارها و همچنین عوامل حدت می باشد. تمامی جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس از روی حساسیت به 27 باکتری خوار لیزوژنیک در 6 گروه طبقه بندی می شوند. تغییر لیزوژنیک مرتبط با عوامل حدت مانند انتروتوکسین های مختلف، استافیلوکیناز، همولایزین ?، لیپاز، اکسفولیاتیو توکسین a، سم سندرم شوک سمی و لکوسیدین پنتون ولنتاین ناشی از وجود پروفاژهای مختلف در جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس می باشد. مقاومت به متی سیلین در جدایه-های استافیلوکوکوس اورئوس ناشی از حضور ژن meca است. ژن meca، ژن های تنظیم کننده و همچنین ژن های رمزکننده مقاومت به چند عامل ضد باکتریایی و لوکوس ژنی ccr بر روی کاست ژنی sccmec قرار گرفته اند. این مطالعه با هدف تجزیه و تحلیل ژنتیکی پروفاژ تایپ های مختلف، بررسی انتشار کلونال، تعیین الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی و تایپینگ کاست ژنی meca و لوکوکوس ژنی ccr و همچنین بررسی عوامل حدت و میزان بیان آن ها در جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین جداسازی شده از نمونه های بالینی، دامی و محیطی در شهر تهران در طی سال های 1391-1387 به انجام رسید. در این مطالعه در مجموع 319 جدایه بالینی، ماکیان و محیطی استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین جداسازی شده از چهار بیمارستان، دو دامداری و یک تصفیه خانه فاضلاب در شهر تهران مورد بررسی و مطالعه قرار گرفتند. تمامی جدایه ها با استفاده از پرایمر اختصاصی تا حد گونه شناسایی شدند و به روش های phene-plate و الکتروفورز ژل در میدان ضربانی دسته بندی گردیدند. حساسیت جدایه ها نسبت به 17 آنتی بیوتیک به روش دیسک دیفیوژن و همچنین حداقل غلظت مهار کننده آنها نسبت به آنتی بیوتیک های اگزاسیلین و ونکومایسین به روش etest با استفاده از توصیه های clinical laboratory and standard institute (clsi) تعیین گردید. حضور ژن meca در میان جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین با استفاده از آزمون pcr مورد بررسی قرار گرفت. جهت تعیین وجود پروفاژهای مختلف در جدایه های مقاوم به متی سلین آزمون multiplex-pcr با استفاده از پرایمرهای اختصاصی 6 دسته پروفاژی مورد استفاده قرار گرفت. جهت اثبات لیزوژن بودن پروفاژها در جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین از آزمون های سنجش پلاک و نقطه استفاده گردید. وجود پروفاژ تایپ ها و باکتری خوارهای مختلف به ترتیب در میان نواحی غیر آلوده و پلاک ها با استفاده از آزمون multiplex-pcr مشخص گردید. عوامل حدت شامل 16 ژن انتروتوکسین (sea-seq) و ژن های hlb، pvl، sak، tst، eta و etb به روش pcr مورد شناسایی قرار گرفتند. تایپ کاست ژنی meca و لوکوس ژنی ccr در این جدایه ها مورد بررسی قرار گرفت. بیان ژن های پروفاژی و انتروتوکسین ها در میان جدایه ها با استفاده از آزمون real-time pcr مورد سنجش قرار گرفت. با استفاده از آزمون pcr تمامی 319 جدایه جمع آوری شده به عنوان جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین مورد تأیید قرار گرفتند. بیشترین میزان مقاومت به ترتیب نسبت به آنتی بیوتیک های پنی سیلین (100 درصد)، سیپروفلوکساسین (96 درصد)، اریترومایسین (93 درصد)، توبرامایسین (93 درصد)، کانامایسین (92 درصد)، کلیندامایسین (87 درصد)، تتراسایکلین (87 درصد) و آمیکاسین (87 درصد) مشاهده گردید. هیچکدام از 319 جدایه نسبت به آنتی بیوتیک های ونکومایسین، لینزولید و سینرسید مقاومت نشان ندادند. سه درصد جدایه ها تنها نسبت به پنی سیلین مقاوم بودند و 34 درصد جدایه ها نیز نسبت به 11 آنتی بیوتیک مقاومت نشان دادند. همچنین 3 و 88 درصد جدایه ها به ترتیب از مقاومت پایین (mic?4 µg/ml) و بسیار بالا (mic?256 µg/ml)نسبت به اگزاسیلین برخوردار بودند. پنج پروفاژ تایپ مختلف در میان جدایه ها شناسایی گردید و تمامی جدایه ها واجد حداقل 1 پروفاژ تایپ بودند. 83% جدایه ها واجد 4 پروفاژ تایپ و 12 درصد نیز واجد 3 پروفاژ تایپ بودند. پس از القاء پروفاژ در میان جدایه ها، پلاک های با مرکز کدر ظاهر شدند که نشان دهنده لیزوژن بودن این پروفاژها بود. در نواحی غیر آلوده باکتریایی، باندهای مربوط به پروفاژ تایپ های مختلف و همچنین باند مربوط به ژن nuc مشاهده گردید اما در پلاک ها تنها باندهای متعلق به باکتری خوارها مشاهده گردید. صد درصد جدایه ها واجد ژن های sea، sek، seq و hlb بودند. همچنین 93،83، 32، 19، 14، 7، 4، 4، 3، 3/1، 1 و 3/0 درصد جدایه ها نیز به ترتیب واجد ژن های sak، eta، sel، seg، sem، sei، sen، pvl، seo، tst، sec و sep بودند. در مجموع 20 پالسوتایپ در میان جدایه ها شناسایی گردیدند که شامل هشت تیپ منفرد (st) و دوازده تیپ مشترک (ct) بودند و چهار ct به طور غالب در هر 3 منبع در حال گردش بودند. نود و شش، 3 و 1 درصد جدایه ها به ترتیب واجد sccmec تایپ iii، iva و ivc بودند. همچنین 96 و 4 درصد جدایه ها واجد ccr تایپ های 3 و 2 بودند. تمامی جدایه ها ژن های انتروتوکسینی و پروفاژها را بیان نمودند و میزان بیان در میان آن ها متفاوت بود. نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد علیرغم اینکه باکتری خوارها از تنوع بالایی در جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین برخوردار بودند اما این تنوع در جدایه های بالینی بسیار بیشتر از جدایه های دامی و محیطی بود. پروفاژ تایپ sgf شایعترین تایپ بود و در تمامی جدایه ها مشاهده گردید که نشان دهنده قابلیت تولید طیف وسیعی از عوامل حدت توسط تمامی جدایه ها است. وجود پروفاژهایی از دسته های مختلف، طیف وسیعی از عوامل حدت و همچنین مقاومت بالای جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین می تواند نشان دهنده اهمیت نقش باکتری خوارها در گسترش و تکامل عوامل حدت و همچنین ناهمگونی کلاستر مقاومت به متی سیلین در جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس باشد. وجود این جدایه های بسیار بیماری زا واجد مقاومت چندگانه نسبت به بسیاری از داروهای معمول خطوط اول و دوم درمانی می تواند یک تهدید بالقوه برای سلامت عمومی و بهداشت جامعه باشد.

اساتید راهنما و مشاور

محمد رضا پورشفیع، مجید بوذری

پایان‌نامه‌های مشابه

اسناد مشابه

  • مطالعه فراوانی ژن های کد کننده انتروتوکسین و الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی ایزوله های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین جدا شده از نمونه های سبزیجات و سالاد در استان چهارمحال و بختیاری

    مقاله۲۰۲۰میکروب شناسی مواد غذاییابراهیم رحیمی، امیر شاکریان، فرهاد صفرپور دهکردی، منوچهر مومنی شهرکی

    استافیلوکوکوس ­ اورئوس مقاوم به متی­سیلین یکی از اصلی­ترین عوامل نوظهور ایجاد کننده مسمومیت­های غذایی مقاوم به آنتی­بیوتیک در انسان است. باکتری همچنین توانایی تولید انتروتوکسین مقاوم به حرارت را دارد. مطالعه حاضر به منظور ارزیابی میزان شیوع، الگوی مقاومت آنتی­بیوتیکی و فراوانی ژن

  • شناسایی سویه های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین به روش های فنوتیپی و ملکولی در جدایه های بالینی

    مقالهmedical laboratory journalزینب زارع، zare, z islamic azad university, jahrom branch, jahrom, iranگروه میکروبیولوژی کاوس صلح جو، solhjoo, k department of microbiology, faculty of medicine, jahrom university of medical sciences, jahrom, iranگروه میکروبیولوژی محمد جواد نوروز نژاد، norooznejad, mj islamic azad university, jahrom branch, jahrom, iranگروه میکروبیولوژی اکبر کاظمی

    چکیده زمینه و هدف: شیوع روز افزون سویه های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین (mrsa) به همراه توانایی این باکتری در ایجاد مقاومت چند دارویی، درمان عفونت های ناشی از این باکتری را با مشکل همراه ساخته است. بنابراین شناسایی و تعیین فراوانی سویه های mrsa به روش های فنوتیپی و ملک

  • فراوانی و الگوی مقاومت جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین جدا شده از عفونت های بیمارستانی

    مقالهmedical laboratory journalپریسا بهشود، behshood, p young researchers and elite club, islamic azad university, falavarjan branch, isfahan, iranدانشگاه آزاد اسلامی، واحد فلاورجان، باشگاه پژوهشگران جوان و نخبگان، اصفهان، ایران وﺟﻴﻬﻪ ﻛﺮﺑﺎﺳﻲزاده، karbasizade, v school of biology, islamic azad university, falavarjan branch, isfahan, iranداﻧﺸﻜﺪه ی ﻋﻠﻮم زﻳﺴﺘﻲ، داﻧﺸﮕﺎه آزاد اﺳﻼﻣﻲ واﺣﺪ ﻓﻼورﺟﺎن، اﺻﻔﻬﺎن، اﻳﺮان نفیسه السادات نقوی، naghavi, ns school of biology, falavarjan branch, islamic azad university, isfahan, iranداﻧﺸﮕﺎه آزاد اﺳﻼﻣﻲ واﺣﺪ ﻓﻼورﺟﺎن، اﺻﻔﻬﺎن، اﻳﺮان

    چکیده: زمینه و هدف: استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین(mrsa) یکی از عوامل بیماری زای اصلی درگیر در عفونت های بیمارستانی است. افزایش مقاومت آنتی بیوتیکی این سویه ها، درمان این عفونت ها بسیار دشوار نموده است. هدف از این مطالعه تعیین فراوانی و الگوی مقاومت دارویی جدایه های mrsa

  • شیوع سویه های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین مولد انتروتوکسین a و b

    مقالهمجله دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی تهرانصفیه عباسی، safiyeh abbasi department of microbiology, immunology, student's research committee, shahrekord university of medical sciences, shahrekord, iran. tel: +98 381 3346732شهرکرد، دانشگاه علوم پزشکی شهرکرد، گروه میکروب شناسی و ایمنی شناسی، کمیته تحقیقات دانشجویی تلفن: 3346732 -0381 ساسان طاعی، sassan taei department of medical microbiology, faculty of medicine, urmia university of medical sciences, urmia, iran.گروه میکروب شناسی، دانشگاه علوم پزشکی ارومیه بهنام زمانزاد، behnam zamanzad department of microbiology, faculty of medicine, shahrekord university of medical sciences, shahrekord, iran.گروه میکروب شناسی، دانشگاه علوم پزشکی شهرکرد

    زمینه و هدف: انتروتوکسین های a و b از جمله فاکتورهای بیماری زایی مهم استافیلوکوکوس اورئوس هستند که همگی سوپر آنتی ژن بوده و از جمله عوامل ناراحتی های گوارشی هستند. این مطالعه به منظور شیوع فراوانی ژن های مولد انتروتوکسین در سویه های بالینی استافیلوکوکوس اورئوس (sea, seb) جدا شده

  • تشخیص مولکولی استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین مولد انتروتوکسین A در شیرینی‌های خامه‌ای در شهرستان کرج در سال1395

    مقاله۲۰۱۹علوم غذایی و تغذیهمهسا مکوندی، ناصر هرزندی

    مقدمه: انتروتوکسین‌های استافیلوکوکوسی متعلق به خانواده‌ای از اگزوتوکسین‌های استافیلوکوکوسی و استرپتوکوکوسی با بیش از بیست عضو هستند که از نظر عملکردی با یکدیگر مرتبط بوده و دارای همسانی و شباهت توالی می‌باشند. این پروتئین‌های باکتریایی، میتوژن بوده و عامل ایجاد بیماری‌های انسانی

  • شناسایی الگوی ژن های مولد توکسین های sec، hla، pvl و tsst-۱ در جدایه های بالینی استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین

    مقالهمجله دانشگاه علوم پزشکی ایلامزهرا فتحعلی، dept of microbiology, islamic azad university, boroujerd branch, boroujerd, iranگروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد بروجرد، بروجرد، ایران محسن میرزایی، mohsen mirzaee dept of lab sciences, faculty of medical sciences, islamic azad university, boroujerd branch, boroujerd, iraبروجرد- میدان مدرس- معاونت علوم پزشکی دانشگاه آزاد واحد بروجرد- گروه علوم آزمایشگاهی شهین نجارپیرایه، dept of bacteriology, faculty of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iranگروه باکتری شناسی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران

    مقدمه: استافیلوکوکوس اورئوس طیف وسیعی از اگزوتوکسین هایی را تولید می کند که در ایجاد بیماری در میزبان نقش دارند. تقریباً همه سویه های گروهی از سیتوتوکسین ها را تولید می کنند. سوپر آنتی ژن های پیروژنیک(ptsag) گروهی از اگزوتوکسین ها هستند که توسط استافیلوکوکوس اورئوس تولید می شوند.