کشت آزمایشگاهی والگوی بیان ژن های بلوغ در فولیکول های پرآنترال احاطه شده با آلژینیت، پس از انجماد شیشه ای و آهسته ی بافت تخمدان موش.
چکیده
به منظور مقایسه اثر انجمادآهسته و شیشه ای بافت تخمدان بر روند رشد فولیکول پرآنترال کشت داده شده در سیستم سه بعدی و الگوی بیان ژن های بلوغ و تکوین فولیکول ها، تخمدان های موش های سوری نابالغ ماده 14-12 روزه در سه گروه کنترل، انجمادشیشه ای و انجمادآهسته مورد مطالعه قرارگرفتند. در انجمادآهسته تخمدان هادر فریزر برنامه ریزی شده منجمد شدند و در انجمادشیشه ای نیز در محلول های انجمادی به روش needle immersed انجام شد. در مرحله بعد فولیکول های پرآنترال با قطر متوسط به روش مکانیکی از تخمدان-های تازه و منجمد- ذوب شده جدا و به مدت 12 روز در سیستم کشت سه بعدی در سدیم-آلژینیت 0/7% کشت داده شدند. میزان بقا، رشد فولیکول ها، شکل گیری حفره آنتروم و میزان بیان ژن های موثر در بلوغ تخمک (bmp15، gdf9،fgf8 ،igf1 ، kit،kit-l ) پس از 1، 8 و 12 روز کشت، بررسی شد. در نهایت میزان بلوغ تخمک های کشت داده شده ارزیابی گردید. طی ارزیابی بافت شناسی یکپارچگی بافت تخمدان درهر دو گروه انجمادی مشابه گروه کنترل بود. در بررسی میزان بقای فولیکول ها، هر دو گروه انجمادی در روز 8 و 12 بقای کمتری را نسبت به گروه کنترل نشان دادند (0/05 >p). تخمک های یکسانی نیز در هر سه گروه از مرحله gv خارج شده و به مرحله mii رسیدند. ارزیابی میزان بیان رونوشت ژنهای بلوغ، روند نزولی ژن-های bmp15، gdf9،fgf8 ، kit،kit-l در هر سه گروه را طی کشت نشان داد. مقایسه ی بین گروه های مورد مطالعه افزایش بیان سه ژن kit ، kit-l و gdf-9 در گروه انجمادشیشه ای و ژن igf-1 در گروه انجمادآهسته طی روز اول کشت را نشان داد (0/05 >p). با توجه به نتایج مذکور، فولیکول های زنده مانده پس از فرایند انجماد و ذوب در هر دو گروه انجمادی با انجام یک واکنش جبرانی نه تنها بقای خود را حفظ و به رشد خود ادامه دادند، بلکه به صورت یکسان بر تکوین تخمک ها تأثیرگذار بودند.