مقاله

کلون سازی و مطالعه بیان فاکتور بافتی نوترکیب در سلول های یوکاریوتیک cho

مونا خورشیدفر، m. khorshidfar مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون ناصر امیری زاده، n. amirizadeh استادی ـار مـرکز تحقیقـــات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشـی طـب انتقـ ـال خـ ـونسازمان اصلی تایید شده: سازمان انتقال خون ایران (blood transfusion research center) مهریار حبیبی رودکنار، m. habibi roudkenar دانشیار مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خونسازمان اصلی تایید شده: سازمان انتقال خون ایران (blood transfusion research center)

چکیده

چکید ه سابقه و هدف فاکتور بافتی( tf )، اصلی ترین آغازکننده آبشار انعقادی است. برای بررسی مسیر خارجی انعقاد، اندازه گیری زمان پروترومبین بهترین روش است که در این روش با توجه به tf به کار گرفته شده، نوساناتی در نتیجه آزمایش دیده می شود. در این مطالعه با هدف دستیابی به نتایجی با تکرارپذیری بیشتر، از tf نوترکیب استفاده شده است. مواد و روش ها مطالعه انجام شده از نوع تجربی بود. cdna فاکتور بافتی در پلاسمید pcdna3.1 کلون و به سلول های cho منتقل گردید. پروتئین های سلول های cho ترانسفکت شده استخراج و پس از جداسازی با روش sds-page با وسترن بلات آنالیز شدند. سلول های cho که tf را بیان می کردند در حضور کلروکلسیم به پلاسمای سیتراته افزوده شدند و زمان لخته شدن پلاسما ثبت گردید. فعال سازی فاکتور vii در پلاسما با روش الایزا مورد بررسی قرار گرفت. یافته ها در آنالیز پروتئین های جدا شده از سلول های ترانسفکت شده با روش sds-page ، باندی حدود 40 کیلودالتون مشاهده شد که با آنتی بادی مونوکلونال tf در آنالیز وسترن بلات مورد تایید قرار گرفت. زمان انعقاد پلاسما در مقایسه با سلول های cho ترانسفکت نشده, از 3 دقیقه به 3 ± 21 ثانیه کاهش یافت. هم چنین اضافه کردن غشای این سلول ها به پلاسما در حضور کلرور کلسیم، موجب فعال سازی فاکتور vii به میزان ng/ml 35 ±810 شد. نتیجه گیری tf نوترکیب بیان شده در سلول های cho ، قادر به لخته کردن پلاسمای سیتراته و فعال سازی فاکتور vii بود.

اسناد مشابه

  • کلون‌سازی و مطالعه بیان فاکتور بافتی نوترکیب در سلول‌های یوکاریوتیک CHO

    مقاله۲۰۱۱فصلنامه پژوهشی خونمونا خورشیدفر، ناصر امیری‌زاده، مهریار حبیبی رودکنار

    چکید ه سابقه و هدف فاکتور بافتی( TF )، اصلی‌ترین آغازکننده آبشار انعقادی است. برای بررسی مسیر خارجی انعقاد، اندازه‌گیری زمان پروترومبین بهترین روش است که در این روش با توجه به TF به کار گرفته شده، نوساناتی در نتیجه آزمایش دیده می‌شود. در این مطالعه با هدف دستیابی به نتایجی با تکر

  • بررسی کارایی ژن‏های تنظیم کننده مسیرهای ترجمه و پس از ترجمه در بهینه‏سازی بیان فاکتور فعال‏کننده پلاسمینوژن بافتی

    مقالهکومشاعظم رحیم پور، azam rahimpour school of advanced technologies in medicine, shahidbeheshti university of medical sciences, tehran. iranدانشکده فناوری‏های نوین پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران آزیتا نجایی، azita najaei payame noor university, tehran, iranدانشگاه پیام نور، تهران، ایران فریدون مهبودی، fereidoun mahboudi biotechnology research center, pasteur institute of iran, tehran, iranمرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران

    سابقه و هدف: سلول‏های تخمدان همستر چینی (cho)پرکاربردترین سیستم میزبانی برای بیان پروتئین‏های نوترکیب می‏باشند. روش‏های متنوعی هم چون ایجاد وکتورهای بیانی بهینه و نیز میزبان‏های مهندسی شده برای افزایش میزان بیان پروتئین در این میزبان به‏کار گرفته شده‏اند. در این مطالعه روش مهندسی

  • بررسی کارایی ژن‏های تنظیم‌کننده مسیرهای ترجمه و پس از ترجمه در بهینه‏سازی بیان فاکتور فعال‏کننده پلاسمینوژن بافتی

    مقاله۲۰۱۵کومشرحیم پور, اعظم، مهبودی, فریدون، نجایی, آزیتا

    سابقه و هدف: سلول‏های تخمدان همستر چینی (CHO)پرکاربردترین سیستم میزبانی برای بیان پروتئین‏های نوترکیب می‏باشند. روش‏های متنوعی هم‌چون ایجاد وکتورهای بیانی بهینه و نیز میزبان‏های مهندسی شده برای افزایش میزان بیان پروتئین در این میزبان به‏کار گرفته شده‏اند. در این مطالعه روش مهندسی

  • افزایش بیان عامل فعال کننده پلاسمینوژن بافتی نوترکیب در سلول‏های cho با استفاده از ناقل بیانی حاوی نواحی متصل شونده به ماتریکس و روش فعال‏سازی راه‏انداز

    مقالهپژوهش های آسیب شناسی زیستیazam rahimpour، department of medical biotechnology, biotechnology research center, pasteur institute of iran, tehran, iran behrouz vaziri، department of medical biotechnology, biotechnology research center, pasteur institute of iran, tehran, iran farzaneh barkhordari، department of medical biotechnology, biotechnology research center, pasteur institute of iran, tehran, iran leila nematollahi

    هدف: ایجاد رده‏های سلولی دارای بیان بالا یک مرحله محدود کننده اصلی در روند تولید پروتئین‏های نوترکیب دارویی است. در این مطالعه اثر به‏کارگیری ناحیه متصل شونده به ماتریکس ژن اینترفرون بتای انسانی به‏همراه روش فعال‏سازی راه‏انداز از طریق پروتئین e1a 13s بر بیان فاکتور فعال کننده پل

  • کلون سازی و بیان ژن هیرودین نوترکیب در رده سلولی CHO

    مقاله۲۰۲۰پاتوبیولوژی مقایسه ایعلی شریف زاده .

    هیرودین پروتئینی به طول 66-65 اسیدآمینه می باشد که از غدد بزاقی زالو ترشح و به عنوان یک داروی ضدانعقاد مطرح است. این دارو مهارکننده بسیار قوی ترومبین بوده و در ممانعت از ترومبوسهای عروقی موثر است. هدف از این تحقیق بررسی بیان ژن هیرودین در سلول های CHO به عنوان یک سلول یوکاریوتی ب

  • استرپتوکیناز: استخراج،کلون سازی و بیان بالای پروتئین نوترکیب فعال

    مقالهپژوهش در پزشکیمحمدرضا نژاد مقدم، mr1 nejad moghaddam research center for biologic nanotechnology, avesina research institute for modern medical science, tehran* مرکز تحقیقات نانوتکنولوژی زیستی، پژوهشکده فن آوری های نوین علوم پزشکی جهاد دانشگاهی ابن سینا، تهران سیدمحمدحسین مدرسی، mh2 modarresi 2research center for reproductive biotechnology, avesina research institute for modern medical science, tehran** مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی تولیدمثل، پژوهشکده فن آوری های نوین علوم پزشکی جهاد دانشگاهی ابن سینا، تهران محمد باباشمسی، m3 babashamsi 3research center for monoclonal antibody, avesina research institute for modern medical science, tehranمرکز تحقیقات آنتی بادی منوکلونال، پژوهشکده فن آوری های نوین علوم پزشکی جهاد دانشگاهی ابن سینا، تهران محمود چمن خواه

    چکیده سابقه و هدف: استرپتوکیناز به عنوان شناخته شده ترین داروی فیبرینولیتیک، مدت مدیدی است در درمان سکته قلبی استفاده می شود. ویژگیهای ساختاری ساده این پروتئین زمینه لازم برای دستیابی به انواع نوترکیب آن را فراهم ساخته است. هدف از این تحقیق تهیه سوش استرپتوکوک equisimilis h46a (پ