مقاله

افزایش بیان عامل فعال کننده پلاسمینوژن بافتی نوترکیب در سلول‏های cho با استفاده از ناقل بیانی حاوی نواحی متصل شونده به ماتریکس و روش فعال‏سازی راه‏انداز

چکیده

هدف: ایجاد رده‏های سلولی دارای بیان بالا یک مرحله محدود کننده اصلی در روند تولید پروتئین‏های نوترکیب دارویی است. در این مطالعه اثر به‏کارگیری ناحیه متصل شونده به ماتریکس ژن اینترفرون بتای انسانی به‏همراه روش فعال‏سازی راه‏انداز از طریق پروتئین e1a 13s بر بیان فاکتور فعال کننده پلاسمینوژن بافتی (t-pa) در سلول‏های تخمدان هامستر چینی بررسی شده است. مواد و روش‏ها: ناحیه متصل شونده به ماتریکس در سمت ΄5 و΄3 واحد بیان کننده t-pa در ناقل ptpa کلون شد تا ناقل pmtpa به‏دست آید. پس از ترانسفکشن سلول‏ها با ناقل‏های ptpa و pmtpa، رده‏های سلولی پایدار ایجاد شده و میزان بیان t-pa برای هر رده تعیین شد. در مرحله بعد، پلاسمید بیان کننده e1a 13s به سلول‏های پایدار ترانسفکت شده و میزان بیان t-pa پس از 72 ساعت اندازه‏گیری شد. نتایج: الحاق ناقلین ptpa و pmtpa به ژنوم سلول cho از طریق انجام pcr روی dna ژنومی سلول‏های پایدار تأیید شد. بررسی میزان بیان t-pa افزایش بیان به‏میزان سه برابر را در سلول‏های ترانسفکت شده با ناقل pmtpa در مقایسه با رده ایجاد شده با ptpa نشان داد. بیان موقتی e1a 13s در رده‏های پایدار منجر به افزایش تیتر t-pa به 1771 واحد در هر میلی‏لیتر در سلول‏های ایجاد شده با ناقل pmtpa شد. نتیجه‏گیری: نتایج این تحقیق نشان‏دهنده آنست که به‏کارگیری ناحیه متصل شونده به ماتریکس در ناقل بیانی به‏همراه روش فعال‏سازی راه‏انداز می‏تواند به‏صورت مؤثر میزان بیان پروتئین‏های نوترکیب در سلول‏های cho را افزایش دهد.

اسناد مشابه

  • بررسی کارایی ژن‏های تنظیم کننده مسیرهای ترجمه و پس از ترجمه در بهینه‏سازی بیان فاکتور فعال‏کننده پلاسمینوژن بافتی

    مقالهکومشاعظم رحیم پور، azam rahimpour school of advanced technologies in medicine, shahidbeheshti university of medical sciences, tehran. iranدانشکده فناوری‏های نوین پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران آزیتا نجایی، azita najaei payame noor university, tehran, iranدانشگاه پیام نور، تهران، ایران فریدون مهبودی، fereidoun mahboudi biotechnology research center, pasteur institute of iran, tehran, iranمرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران

    سابقه و هدف: سلول‏های تخمدان همستر چینی (cho)پرکاربردترین سیستم میزبانی برای بیان پروتئین‏های نوترکیب می‏باشند. روش‏های متنوعی هم چون ایجاد وکتورهای بیانی بهینه و نیز میزبان‏های مهندسی شده برای افزایش میزان بیان پروتئین در این میزبان به‏کار گرفته شده‏اند. در این مطالعه روش مهندسی

  • بررسی کارایی ژن‏های تنظیم‌کننده مسیرهای ترجمه و پس از ترجمه در بهینه‏سازی بیان فاکتور فعال‏کننده پلاسمینوژن بافتی

    سابقه و هدف: سلول‏های تخمدان همستر چینی (CHO)پرکاربردترین سیستم میزبانی برای بیان پروتئین‏های نوترکیب می‏باشند. روش‏های متنوعی هم‌چون ایجاد وکتورهای بیانی بهینه و نیز میزبان‏های مهندسی شده برای افزایش میزان بیان پروتئین در این میزبان به‏کار گرفته شده‏اند. در این مطالعه روش مهندسی

  • طراحی و ساخت ناقل بیانی ژن فعال کننده پلاسمینوژن بافتی انسانی برای قارچ دکمه ای سفید agaricus bisporus

    مقالهفن آوری زیستی در کشاورزیمحسن اشرفی، دانشجوی دکترای بیوتکنولوژی کشاورزی، گروه بیوتکنولوژی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه زنجان، زنجان محمد فارسی، استاد گروه بیوتکنولوژی و به نژادی گیاهان زراعی، دانشکده کشاورزی دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد امین میرشمسی کاخکی، استادیار گروه بیوتکنولوژی و به نژادی گیاهان زراعی، دانشکده کشاورزی دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد مژگان پروندی

    سیستم گلیکوزیلاسیون قارچ دکمه ای سفید مشابهت زیادی با سلول های پستانداران دارد و سبب شده است تا این قارچ برای بیان پروتئین های نوترکیب گلیکوزیله، از جایگاه قابل توجهی برخوردار گردد. فعال کننده پلاسمینوژن بافتی انسانی یک پلی پپتید تک زنجیره ای گلیکوزیله است که سبب از بین رفتن لخته

  • بیان ژن انسانی فعال کننده پلاسمینوژن بافتی(tPA)در گیاه توتون تراریخته

    مقاله۲۰۰۹ژنتیک نوینمعصومی اصل، م جلالی جواران، ف بهبودی، ه علیزاده
  • همسانه سازی ژن فعال کننده پلاسمینوژن بافتی نوترکیب (tpa) انسانی و انتقال آن به کلروپلاست توتون با استفاده از روش بمباران ذره ای

    پایان‌نامه۲۰۱۳وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده کشاورزیمریم عبدلی نسب

    گیاهان یک جایگزین مناسب برای سیستم های معمول بیان پروتئین های نوترکیب، نظیر حیوانات یا سیستم های میکروبی می باشند. در زراعت مولکولی علاوه بر بیان موقت ژن (های) هدف می توان آنها را به هسته یا کلروپلاست سلول گیاهی منتقل کرد. به دلیل پلی پلوئیدی ژنوم پلاستیدهای گیاهی، در صورت تراریخ

  • کلون سازی و مطالعه بیان فاکتور بافتی نوترکیب در سلول های یوکاریوتیک cho

    مقالهفصلنامه پژوهشی خونمونا خورشیدفر، m. khorshidfar مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون ناصر امیری زاده، n. amirizadeh استادی ـار مـرکز تحقیقـــات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشـی طـب انتقـ ـال خـ ـونسازمان اصلی تایید شده: سازمان انتقال خون ایران (blood transfusion research center) مهریار حبیبی رودکنار، m. habibi roudkenar دانشیار مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خونسازمان اصلی تایید شده: سازمان انتقال خون ایران (blood transfusion research center)

    چکید ه سابقه و هدف فاکتور بافتی( tf )، اصلی ترین آغازکننده آبشار انعقادی است. برای بررسی مسیر خارجی انعقاد، اندازه گیری زمان پروترومبین بهترین روش است که در این روش با توجه به tf به کار گرفته شده، نوساناتی در نتیجه آزمایش دیده می شود. در این مطالعه با هدف دستیابی به نتایجی با تکر