بهینه سازی شرایط تولید ترکیبات پروتئینی با خاصیت ضد میکروبی در سه جدایه پروبیوتیک و اثر آن بر listeria monocytogenes
چکیده
چکیده مقدمه: باکتریوسین های حاصل از lactobacillus spp دارای فعالیت مهار کنندگی وسیعی علیه میکروارگانیسم های پاتوژن مواد غذایی اند. هدف از این مطالعه بهینهسازی شرایط تولید ترکیبات پروتئینی در سه جدایه پروبیوتیک و بررسی اثر باکتریوسین استخراج شده بر l. monocytogenes بود. مواد و روش ها: از 20 نمونه ماست محلی جدایه های لاکتوباسیل بدست آمد و به منظور بهینه سازی شرایط تولید ترکیبات پروتئینی، جدایه های بومی و استاندارد در 4 دمای مختلف نگهداری شدند، همچنین تاثیر اکسیژن و دی اکسید کربن و ترکیب محیط کشت در سه محیط skim milk، mrs و mrs به همراه عصاره مخمر بر روی لاکتوباسیل ها ارزیابی شد و با اضافه کردن ترکیبات معدنی توان تولید باکتریوسین در جدایه ها بررسی گشت. با استفاده از روش لوری، میزان پروتئین محلول تعیین گردید و توسط سولفات آمونیوم، دیالیز و sds-page باکتریوسین ها استخراج، خالص سازی، وزن مولکولی آنها تعیین و اثر باکتریوسین استخراج شده برl. monocytogenes ارزیابی شد. یافته ها: در مجموع سه جدایه لاکتوباسیل با فعالیت بالای مهارکنندگی بدست آمد. بیشترین فعالیت باکتریوسین در دمای ºc30 بعد از گذشت 23 ساعت در محیط mrs به همراه عصاره مخمر تعیین گردید. نتایج حاصل از تلقیح لاکتوباسیل ها در جو % 5 co2 و انکوباتور معمولی یکسان بود. ترکیبات معدنی هیچ تاثیری در تولید باکتریوسین نداشتند. بهترین سویه ln10 گزارش شد که هاله عدم رشد آن 30 میلی متر تعیین گردید. نتایج sds-page ایجاد تک باند پروتئینی با وزن 50 تا 58 کیلودالتون را نشان داد. نتیجه گیری: در این تحقیق، حداکثر تولید باکتریوسین در فازلگاریتمی رشد حاصل شد درحالی که تولید این ترکیبات در سه سویه استاندارد در ابتدای فاز رکود مشاهده گردید. واژههای کلیدی : باکتریوسین، بهینه سازی، پروبیوتیک، لاکتوباسیل، listeria monocytogenes