کلونینگ و بهینه سازی کدون ژن فنیل آلانین دهیدروژناز در سیستم بیانی e.coli و مقایسه بیان ژن با دو پروموتور t۷ و λpr
سعید حیدری کشل، saeed heidari-keshel student research committee, proteomics research center, faculty of paramedical sciences, shahid beheshti university of medical sciences, tehran, iran,department of tissue engineering, faculty of advanced medical technologies, tehran university of medical sciences, tehran, iranمرکز تحقیقات پروتئومیکس، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی , واحد فراهم آوری سلول های بنیادی، مرکز تحقیقات چشم، بیمارستان فارابی، دانشگاه علوم پزشکی تهران صنم زندیان، sanam zandian department of pharmacognosy, faculty of pharmacy, shiraz university of medical sciences, shiraz, iranدانشکده داروسازی، دانشگاه علوم پزشکی شیراز فریبا قاسم وند، fariba ghasemvand enzyme technology laboratory, biochemistry department, pasteur institute of iran, tehran, iranآزمایشگاه تکنولوژی آنزیم، گروه بیوشیمی، انستیتو پاستور ایران سعید رحمان زاده، saeid rahman zadeh enzyme technology laboratory, biochemistry department, pasteur institute of iran, tehran, iranآزمایشگاه تکنولوژی آنزیم، گروه بیوشیمی، انستیتو پاستور ایران معصومه ایمان زاد، masoumeh manzad faculty of medicine, tabriz university of medical sciences, tabriz, iranدانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز نوید نظافت، navid nezafat enzyme technology laboratory, biochemistry department, pasteur institute of iran, tehran, iranآزمایشگاه تکنولوژی آنزیم، گروه بیوشیمی، انستیتو پاستور ایران
چکیده
چکیده سابقه و هدف: یکی از کاربردهای پزشکی آنزیم فنیل آلانین دهیدروژناز، تعیین مقدار دقیق سطح l- فنیل آلانین در سرم خون افراد جهت شناسایی بیماران مبتلا به بیماری فنیل کتونوریا می باشد. در این مطالعه، میزان بیان پروتئین مورد نظر بعد از بهینه سازی کدون ژنی (pdh ) در دو ناقل بیانی pet-23a و ppr37 در میزبان بیانی e.coli بررسی شد. روش بررسی: در این تحقیق تجربی، از ژن فنیل آلانین دهیدروژناز (pdh) بهینه سازی شده مربوط به باکتری b. sphaericus استفاده شد که در دو ناقل بیانی pet-23a و ppr37 کلون گردید. بیان ژن pdh در ناقلین بیانی pet-23a و ppr37 به ترتیب با افزودن القاگر شیمیایی iptg(1mm) و تغییر دمایی 30 به 42 درجه سانتی گراد صورت گرفت. بهینه سازی کدون با نرم افزار jcat انجام گرفت . آنزیم فنیل آلانین دهیدروژناز(phedh) با استفاده از ستون کروماتوگرافیni-nta تخلیص گردید. در ادامه با sds-psge 10% وزن مولکولی نسبی زیر واحد phedh را در حدود kda 41 نشان داده شد. همچنین خلوص و میزان پروتئین توسطsds-page تعیین گردید. یافته ها: بیشترین میزان بیان 8 ساعت بعد از القاء در سازه petpdh/ bl21(de3)plyss مشاهده شد، در حالی که میزان بیان در همان مدت زمان در سازه دیگر بسیار پایین بود. فعالیت ویژه آنزیم بعد از به کار گیری روش تخلیصی u/mg 705 از پروتئین محاسبه شد. بیان پروتئین مورد نظر بعد از بهینه سازی کدون و در سازه ژنی petpdh بیشتر بود. نتیجه گیری: با توجه به مقایسه دو سازه ژنی در بیان پروتئین مورد نظر، سازهpetpdh احتمالاًجهت تولید آنزیم pedh در مقیاس بالا مناسب تر بوده و بر اساس این تحقیق برای این کار توصیه می گردد
سابقه و هدف: یکی از کاربردهای پزشکی آنزیم فنیل آلانین دهیدروژناز، تعیین مقدار دقیق سطح L- فنیل آلانین در سرم خون افراد جهت شناسایی بیماران مبتلا به بیماری فنیل کتونوریا می‌باشد. در این مطالعه، میزان بیان پروتئین مورد نظر بعد از بهینه سازی کدون ژنی (pdh ) در دو ناقل بیانی pET-23a
مقالهفصلنامه علوم پزشکی دانشگاه آزاد اسلامی واحد پزشکی تهراننرگس اربابی، narges arbabi islamic azad university, science and research campus, tehran, iranدانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات تهران مهدی بهدانی، mehdi behdani , biotechnology research center, pasteur institute of iran, tehran, iranمرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران مجید گل کار، majid golkar , pasteur institute of iran, tehran, iranانستیتو پاستور ایران سیدحمید آقایی بختیاری
سابقه و هدف: آنژیوژنزیس یا شکل گیری عروق خونی جدید در شرایط فیزیولوژیک و پاتولوژیک مهم ترین عامل رشد و تکثیر سلول ها است. پروتئین plgfیا فاکتور رشد جفتی یکی از مهم ترین پروتئین ها در تحریک آنژیوژنزیس است. در این پژوهش، ژن plgf-1 انسانی از بافت جفت جدا شده و پروتئین مورد نظر در سی
مقاله۲۰۲۲مجله علوم پزشکی پارساحمد فقیه، سید مهدی سادات، اعظم بوالحسنی، شیوا ایرانی
مقدمه: پروتئین تنظیمی Nef و همچنین پروتئین های ساختاری MPER و V3 ویروس HIV-1 از اهداف مهم در مطالعات واکسن به شمار می روند. از این رو در مطالعه حاضر، پروتئین فیوژن Nef-MPER-V3 در سیستم بیانی پروکاریوتی کلون و بیان شد تا به عنوان کاندید مناسب در مطالعات آتی واکسن مورد ارزیابی قرار
مقالهمجله دانشگاه علوم پزشکی همدانقاسم براتی، ghasem barati حسن میرزاحسینی، hasan mirza hosseini جمشید کریمی، jamshid karimi فاطمه ابراهیم زاده
مقدمه و هدف: آنتاگونیست رسپتور (il-1ra) il - 1 یک سایتوکاین ضد التهابی قوی است که باعث محدود کردن اثرات التهابی مربوط به اینترلوکین-1 (il-1) می شود. بعلت تشابه ساختمانی با il-1ra، il-1 به طور رقابتی به رسپتور il-1 متصل می شود ولی هیچ سیگنالی را القا نمی کند. بنابراین در درمان افر
مقدمه و هدف: آنتاگونیست رسپتور (IL-1Ra) IL - 1 یک سایتوکاین ضد التهابی قوی است که باعث محدود کردن اثرات التهابی مربوط به اینترلوکین-1 (IL-1) می شود. بعلت تشابه ساختمانی با IL-1Ra، IL-1 به طور رقابتی به رسپتور IL-1 متصل می شود ولی هیچ سیگنالی را القا نمی کند. بنابراین در درمان افر
سابقه و هدف: آنژیوژنزیس یا شکل گیری عروق خونی جدید در شرایط فیزیولوژیک و پاتولوژیک مهم ترین عامل رشد و تکثیر سلول ها است. پروتئین PLGFیا فاکتور رشد جفتی یکی از مهم ترین پروتئین ها در تحریک آنژیوژنزیس است. در این پژوهش، ژن PLGF-1 انسانی از بافت جفت جدا شده و پروتئین مورد نظر ...