مهار بیان ژن cxcr1 توسط وکتور لنتی ویروسی حامل microrna در سلول های بنیادی سرطانی سینه به منظور القای مرگ سلولی
چکیده
سرطان سینه با وقوع بیش از 5000 مرگ در سال، هنوز از عوامل مهم مرگ ومیر است. با پیدایش فرضیه سلول های بنیادی سرطانی، محققان همواره به دنبال بررسی هدف های ممکن برای از بین بردن آنها بوده اند. این سلول ها، سلول های تمایز نیافته داخل بافت توموری هستند که دارای ویژگی خودتکثیری و توانایی ایجاد تومور جدید می باشند. همچنین این سلول ها به شیمی درمانی و رادیودرمانی مقاومند. ویژگی اخیر دلیل بازگشت تومور پس از این گونه درمان های رایج می باشد. برای ازبین بردن کامل تومور نیاز است که این سلول ها مورد هدف قرار گیرند. مسیرهای پیام دهی التهابی نقش مهمی در برهم کنش بین سلول های بنیادی سرطانی و محیط اطراف آن ها دارند. فعالیت مولکول های دخیل در این مسیرها باعث افزایش قدرت رشد و تکثیر این سلول ها می شود. به عنوان یک عامل التهابی مهم، اینترلوکین 8 پس از اتصال به گیرنده اش cxcr1، سبب افزایش رگ زایی و تکثیر سلولی و نیز بدخیمی در سلول های بنیادی سرطانی سینه می شود. علاوه بر این افزایش بیان ژن cxcr1 در سلول های بنیادی سرطانی سینه با شاخص cd44+/cd24و نیز سلول های با فنوتیپ aldh+ دیده شده است. بنابراین کاهش بیان این ژن می تواند اثر il-8 را روی این سلول ها کاهش دهد و سبب القای مرگ سلولی در آن ها شود. در این مطالعه به منظور ;کاهش بیان ژن cxcr1، microrna ساختگی که دارای توالی های لازم برای پردازش در سلول هدف بود، ابتدا در وکتور pcdna 6.2 کلون شد. سپس قطعه emgfp/microrna به وکتور لنتی ویروسی plex/mcs lentiorf منتقل شد. سلول های hek293t برای تولید ذرات ویروسی حامل قطعه مورد نظر مورد استفاده قرار گرفتند. سلول های رده سلولی mda-mb231 که دارای درصد بالایی سلول های cd44+/cd24- هستند، با ویروس حامل microrna آلوده شدند. روش real-time pcr، کاهش بیان ژن cxcr1 را نسبت به سلول های تیمار نشده نشان داد. کاهش قدرت زنده ماندن سلول ها در اثر این مهار نیز توسط تست mtt تأیید گردید.