پایان‌نامه

کلون سازی و بیان ژن متالوتیونین3 موشی در سیستم پروکاریوتی

سیده سحر مرتضوی فارسانی

چکیده

متالوتیونین ها خانواده ای از پروتئین های با وزن مولکولی پایین، غنی از سیستئین و جذب کننده ی فلز هستند. این پروتئین ها دارای چندین عملکرد مانند خنثی سازی اثر سمی فلزات، تنظیم همئوستازی فلزات ضروری و جمع آوری رادیکال های آزاد سلولی می باشند. مطالعات نشان داده است که متالوتیونین در فرایندهای تکثیر سلولی و آپوپتوز نیز نقش دارد. متالوتیونین ها پلی پپتیدهای تک رشته ای دارای 61 تا 68 آمینواسید شامل 20 ریشه ی سیستئین حفاظت-شده می باشند. ژنوم یوکاریوت ها دارای چند ژن کدکننده ی متالوتیونین است. خانواده ی متالوتیونین طی وقوع مضاعف شدگی چهار ژن اصلی (mt1 تا mt4) را ایجاد کرده است. mt1 و mt2 در همه ی بافت ها بیان می شوند درحالیکه mt3 و mt4 به ترتیب در بافت مغز و سلول های اپیتلیال بیان دارند. mt3 که فاکتور مهارکننده ی رشد سلول های نورونی (gif) نیز نامیده می شود عملکردهای ویژه ای مانند جلوگیری از جوانه زدن نورون ها دارد و در مغز افراد دچار بیماری آلزایمر کاهش می یابد. در این مطالعه cdnaی متالوتیونین3 موشی جداسازی، توالی یابی و در سیستم پروکاریوتی کلون و بیان گردید. rnaی کل سلول از مغز موش استخراج و خالص سازی شد و سپس جهت ساخت cdna تحت واکنش رونویسی معکوس با استفاده از پرایمر الیگوdt قرار گرفت. orf مربوط به ژن mt3 در وکتور pet22b(+) کلون و به باکتری های اشرشیاکلای سوش top10f و bl21 انتقال داده شد. انجام کلونی-pcr، تعیین توالی و بررسی هم ترازی توالی نشان داد که mt3 به درستی کلون شده است. بیان پروتئین توسط پلاسمید نوترکیب ساخته شده توسط sds-page مورد بررسی قرار گرفت و باند مورد نظر با اندازه ی 9.02 کیلو دالتون مشاهده شد.

اساتید راهنما و مشاور

بهناز صفار، علی محمد احدی، هدا آیت

پایان‌نامه‌های مشابه

اسناد مشابه

  • کلون سازی و بیان ژن میدکاین نوترکیب انسانی در اشریشیاکولای سویه ی اوریگامی

    مقالهسلول و بافتسعادت الله غفاری، دانشگاه آزاد اسلامی واحد پزشکی تهران علی اصغر دلدار، گروه ژنتیک و بیوشیمی دانشگاه صنعتی مالک اشتر تهران علی بهرامی، گروه ژنتیک و بیوشیمی دانشگاه صنعتی مالک اشتر تهران عمران اسماعیل زاده

    هدف: هدف این پژوهش کلون سازی و بیان ژن کد کننده‏ی میدکاین انسانی در اشریشیاکولای بوده که پس از انجام مراحل لازم در مقیاس آزمایشگاهی محقق گردید. مواد و روش‏ها: روش ها شامل کشت سلول، استخراج rna، ساخت cdna، تکنیک های کلون سازی، القای بیان با iptg (ایزوپروپیل تیوگالاکتوزیداز)، ارزیا

  • استرپتوکیناز: استخراج،کلون سازی و بیان بالای پروتئین نوترکیب فعال

    مقالهپژوهش در پزشکیمحمدرضا نژاد مقدم، mr1 nejad moghaddam research center for biologic nanotechnology, avesina research institute for modern medical science, tehran* مرکز تحقیقات نانوتکنولوژی زیستی، پژوهشکده فن آوری های نوین علوم پزشکی جهاد دانشگاهی ابن سینا، تهران سیدمحمدحسین مدرسی، mh2 modarresi 2research center for reproductive biotechnology, avesina research institute for modern medical science, tehran** مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی تولیدمثل، پژوهشکده فن آوری های نوین علوم پزشکی جهاد دانشگاهی ابن سینا، تهران محمد باباشمسی، m3 babashamsi 3research center for monoclonal antibody, avesina research institute for modern medical science, tehranمرکز تحقیقات آنتی بادی منوکلونال، پژوهشکده فن آوری های نوین علوم پزشکی جهاد دانشگاهی ابن سینا، تهران محمود چمن خواه

    چکیده سابقه و هدف: استرپتوکیناز به عنوان شناخته شده ترین داروی فیبرینولیتیک، مدت مدیدی است در درمان سکته قلبی استفاده می شود. ویژگیهای ساختاری ساده این پروتئین زمینه لازم برای دستیابی به انواع نوترکیب آن را فراهم ساخته است. هدف از این تحقیق تهیه سوش استرپتوکوک equisimilis h46a (پ

  • کلون سازی و بررسی بیان ژن ureB هلیکوباکتر پیلوری با استفاده از وکتور بیانی pcDNA3.1(+)

    مقاله۲۰۱۶مجله دانشگاه علوم پزشکی جیرفتسمیرا خیری دستنایی، عباس دوستی

    مقدمه: هلیکوباکتر پیلوری عامل بیماری هایی مانند گاستریت، زخم های گوارشی و سرطان غدد لنفاوی و دستگاه گوارشی است. هنوز واکسن موثری علیه هلیکوباکتر پیلوری تولید نشده است. آنزیم اوره آز یکی از عوامل مهم تحریک سیستم ایمنی میزبان است. بنابراین هدف این تحقیق کلون سازی و بررسی بیان ژن ur

  • کلون سازی و بیان ژن میدکاین نوترکیب انسانی در اشریشیاکولای سویه‌ی اوریگامی

    مقاله۲۰۱۵سلول و بافتسعادت الله غفاری، علی اصغر دلدار، علی بهرامی، عمران اسماعیل زاده

    هدف: هدف این پژوهش کلون سازی و بیان ژن کد کنندهی میدکاین انسانی در اشریشیاکولای بوده که پس از انجام مراحل لازم در مقیاس آزمایشگاهی محقق گردید.مواد و روشها: روش‌ها شامل کشت سلول، استخراج RNA، ساخت cDNA، تکنیک‌های کلون‌سازی، القای بیان با IPTG (ایزوپروپیل‌تیوگالاکتوزیداز)، ارزیابی

  • کلون سازی و بیان سیتوپلاسمی l-آسپاراژیناز ii در باکتری اشریشیا کلی

    مقاله۲۰۱۰فصلنامه علمی پژوهشی دنیای میکروب هاحسین مهبودی، منصور عباچی، شهرام عراقی، هاله حامدی فر

    سابقه و هدف: ال-آسپاراژیناز (تیپ ii) با فعالیت ضدتوموری به طور طبیعی توسط باکتری اشریشیا کلی تولید می گردد. این آنزیم با تبدیل ال- آسپاراژین موجود در خون به آمونیوم و آسپارتیک اسید، در درمان لوکمیای لمفوبلاستیک حاد (all) مورد استفاده قرار می گیرد. هدف از این پژوهش، تولید سیتوپلاس

  • کلون سازی، تعیین ترادف و بیان ژن core ویروس هپاتیت c جدا شده از یک بیمار ایرانی مبتلا به هپاتیت مزمن

    مقالهپژوهش های آسیب شناسی زیستیnasrin rastgoo، m.sc. in medical biotechnology, tarbiat modares university, tehran, iran. ali karami، ph.d. in biotechnology, associate professor, bagyatallah university, tehran, iran. farzaneh sabahi، ph.d. in virology, associate professor, tarbiat modares university, tehran, iran

    مقدمه: ویروس هپاتیت c یکی از مهمترین عوامل ایجادکننده هپاتیت حاد ومزمن، سیروز و سرطان کبد در سطح جهان محسوب می شود. به دلیل روند رو به رشد ابتلا به hcv در سطح دنیا تحقیقات گسترد ه ای در نقاط مختلف جهان برای افزایش کیفیت روشهای تشخیصی و تعیین ژنوتیپ ویروس در حال انجام است. روشها: