مقاله

طراحی و ساخت حامل انتحاری pds۱۳۲::∆virg به منظور حذف ژن virg در شیگلا فلکسنری ۲a برای تولید سویه واکسنی زنده تخفیف حدت یافته شیگلا

چکیده

زمینه و هدف: سویه های شیگلا باکتری های گرم منفی هستند که واجد توانایی ورود به درون سلول های غیر فاگوسیتیی، از طریق ترشح پروتئین های افکتور (که آنتی ژن های تهاجمی نامیده می شوند (ipas)) می باشند. یکی از مهمترین آنها پروتئینvirg است. واکسن های زنده تخفیف حدت یافته شیگلا، پاسخ های امیدوار کننده ای را در ایجاد ایمنی حفاظتی در مطالعات بالینی بر روی انسان از خود نشان داده اند. در شرایط حاضر، ساخت سویه های کاندید واکسنی شیگلا بر اساس استفاده از سیستم های تبادل آللی مورد توجه قرار گرفته است. هدف از این مطالعه، طراحی و ساخت حامل pds132::∆virg به عنوان یک ناقل انتحاری برای حذف هدفمند بخشی از ژن virg در سویه شیگلا فلکسنری 2a بود. مواد و روش ها: در این مطالعه کاربردی، گونه و سرووار شیگلای جدا شده با استفاده از آزمایش سرم شناسی و واکنش زنجیره ای پلیمراز (pcr) مورد تایید قرار گرفت. آغازگرهای شناسایی ژن virg طراحی و سپس در حامل pgem-5zf همسانه سازی و تعیین توالی گردید. بر اساس نقشه برش آنزیمی ژن virg، 1751 جفت باز از ژن virg با استفاده از آنزیم محدودکننده hincп حذف و ژن جهش یافته ∆virg به طور موفقیت آمیزی ایجاد گردید. حامل pgem∆virg با استفاده از آنزیم های sphi و sali هضم گردید و سپس در حامل انتحاری (psd132) همسانه سازی شد. صحت فرآیند با آزمایش های فنوتیپی و ژنوتیپی تایید گردید. یافته ها: سویه شیگلا فلکسنری 2a با آزمایش سرم شناسی و pcr مورد تایید قرار گرفت. توالی ژن virg سویه بومی با سویه های ثبت شده در بانک ژنی به لحاظ ترادف ژنی یکسان بود. حامل انتحاری pds132::∆virg با در بر داشتن 1484 جفت باز که از ژن virg مشتق شده است، بنابراین می تواند به عنوان یک ناقل انتحاری اختصاصی در ایجاد تداخل در ژن virg در سویه شیگلا فلکسنری 2a به کار رود. بحث و نتیجه گیری: استفاده از سیستم های انتحاری ایجاد جهش هدفمند را تسهیل و در مقایسه با سایر روش های ابتدایی مانند پاساژ متوالی روش اختصاصی و موثرتری می باشد.

اسناد مشابه

  • طراحی و ساخت وکتور خودکشی pDS132-ΔkanR به منظور حذف ژن مقاومت به آنتی-بیوتیک کانامایسین در بروسلا ملی‌تنسیس سویه Rev1 جهش‌یافته برای تولید سویه کاندید واکسن

    زمینه و اهداف: بروسلوز از مهم‌ترین بیماری‌های مشترک انسان و دام محسوب می‌گردد. بهترین راه مقابله با بروسلوز انجام واکسیناسیون مناسب می­باشد. واکسن­های موجود از قبیل واکسن Rev1 با معایبی چون سقط جنین در حیوانات باردار همراه است لذا تهیه واکسن مناسب برای درمان بروسلوز ضروری می­ باش

  • طراحی و ساخت وکتور خودکشی pds۱۳۲-δkanr به منظور حذف ژن مقاومت به آنتی-بیوتیک کانامایسین در بروسلا ملی تنسیس سویه rev۱ جهش یافته برای تولید سویه کاندید واکسن

    مقالهمجله میکروب شناسی پزشکی ایرانزهرا نساجی، zahra nassaji molecular genetics department, research centre for sciences and biotechnology, malek ashtar university, tehran, iranگروه مهندسی ژنتیک، پژوهشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه مالک اشتر، تهران، ایران علیرضا سعیدی نیا، alireza saeedinia molecular genetics department, research centre for sciences and biotechnology, malek ashtar university, tehran, iranگروه مهندسی ژنتیک، پژوهشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه مالک اشتر، تهران، ایران مهدی زین الدینی، mehdi zeinoddini molecular genetics department, research centre for sciences and biotechnology, malek ashtar university, tehran, iranگروه مهندسی ژنتیک، پژوهشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه مالک اشتر، تهران، ایران علی اصغر دلدار

    زمینه و اهداف: بروسلوز از مهم ترین بیماری های مشترک انسان و دام محسوب می گردد. بهترین راه مقابله با بروسلوز انجام واکسیناسیون مناسب می­باشد. واکسن­های موجود از قبیل واکسن rev1 با معایبی چون سقط جنین در حیوانات باردار همراه است لذا تهیه واکسن مناسب برای درمان بروسلوز ضروری می­ باش

  • ساخت پلاسمید pds۱۳۲::∆icsa جهت حذف هدفمند نواحی از ژن icsa به منظور تولید واکسن زنده تخفیف حدت یافته شیگلا

    مقالهمجله دانشگاه علوم پزشکی اراکمصطفی حسینی، mostafa hosseini applied biotechnology research center, baqiyatallah university of medical sciences, tehran, iranتهران، میدان ونک، خیابان ملاصدرا، دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا... (عج)، پژوهشگاه، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی کاربردی مجتبی سعادتی، mojtaba saadati biology department, imam hosseini university, tehran, iranگروه علوم زیستی، دانشگاه جامع امام حسین (ع)، تهران، ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (baqiyatallah university of medical sciences) محمد باقر یخچالی، mohammad bagher yakhchali 3- department of industry and environment, research center of genetic engineering and biotechnology, tehran, iranروه صنعت و محیط زیست، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (imam hosseyn university) بهار نیری فسایی

    زمینه و هدف: واکسن های زنده تخفیف حدت یافته شیگلا پاسخ های امیدبخشی در ایجاد ایمنی حفاظتی در آزمایشات بالینی بر روی انسان را نشان داده اند. هدف از این تحقیق طراحی و ساخت پلاسمید pds132::∆icsa به عنوان یک ناقل انتحاری برای حذف هدفمند بخشی از ژن icsa در شیگلا می باشد. مواد و روش ها

  • همسانه سازی ژن virg و ساخت سازه جهش یافته pgem∆virg به منظور القای نوترکیبی در سویه شیگلا دیسانتری بومی

    مقالهفصلنامه علوم پزشکی دانشگاه آزاد اسلامی واحد پزشکی تهرانحورا احمدی دانش، hora ahmadi danesh msc student of cellular and molecular biology, department of cell biology, faculty of science, imam hossein university, tehran, iranدانشجوی کارشناسی ارشد زیست شناسی سلولی و مولکولی، گروه زیست شناسی سلولی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین (ع) مجتبی سعادتی، mojtaba saadati phd of bacteriology, department of cell biology, faculty of science, imam hossein university, tehran, iranدکترای باکتری شناسی، گروه زیست شناسی سلولی، دانشکده علوم، دانشگاه امام حسین (ع) محمد درودیان، mohammad doroudian msc student of cellular and molecular biology, islamic azad university, central tehran branch, young reserchers club, tehran, iranدانشجوی کارشناسی ارشد زیست شناسی سلولی و مولکولی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران مرکز، باشگاه پژوهشگران جوان باقر یخچالی

    سابقه و هدف: بیماری شیگلوز از علل عمده ابتلا کودکان به اسهال در ایران است و ژن virg نقش کلیدی را در بیماری زایی و قدرت تهاجم باکتری شیگلا بازی می کند. هدف از این مطالعه، همسانه سازی، توالی یابی ژن virg و ساخت سازه جهش یافته pgem∆virg به منظور القای نوترکیبی در سویه شیگلا بومی با

  • همسانه سازی ژن virG و ساخت سازه جهش یافته pGEM∆virG به منظور القای نوترکیبی در سویه شیگلا دیسانتری بومی

    سابقه و هدف: بیماری شیگلوز از علل عمده ابتلا کودکان به اسهال در ایران است و ژن virG نقش کلیدی را در بیماری‌زایی و قدرت تهاجم باکتری شیگلا بازی می‌کند. هدف از این مطالعه، همسانه سازی، توالی یابی ژن virG و ساخت سازه جهش یافته pGEM∆virG به منظور القای نوترکیبی در سویه شیگلا بومی ...